成纖維細(xì)胞在甲狀腺疾病中的作用研究.pdf

1、背景：
　　成纖維細(xì)胞是人體最多的間質(zhì)細(xì)胞，構(gòu)成了各組織微環(huán)境的主體。生理情況下，成纖維細(xì)胞提供結(jié)構(gòu)支持，在組織受損時填充受損組織，并通過分泌細(xì)胞因子及趨化、黏附因子調(diào)控炎癥反應(yīng)，從而促進(jìn)組織修復(fù)。但在自身免疫性疾病及腫瘤性疾病中，成纖維細(xì)胞可以持續(xù)活化，導(dǎo)致免疫細(xì)胞持續(xù)浸潤并發(fā)揮促癌作用。近年來研究還發(fā)現(xiàn)，成纖維細(xì)胞還可以影響藥物治療的療效。在甲狀腺疾病中，既往研究發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞既是甲狀腺相關(guān)眼?。℅O）的效應(yīng)細(xì)胞，而甲癌中也存

2、在成纖維細(xì)胞增生，但研究相對較少。
　　目的：
　　探討成纖維細(xì)胞在兩種甲狀腺疾病中的作用及臨床應(yīng)用價值。在Graves眼病（GO）中，我們探究成纖維細(xì)胞在糖皮質(zhì)激素(GC)療效反應(yīng)中的作用以及相關(guān)調(diào)控分子的臨床預(yù)測價值。在甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)中，我們研究結(jié)節(jié)不同部位的成纖維細(xì)胞對于腫瘤的促進(jìn)作用，為臨床治療提供依據(jù)。
　　方法：
　　在Graves眼病實(shí)驗(yàn)中，分離得到患者的眶后成纖維細(xì)胞（OF），在高度炎癥環(huán)境刺激

3、下評估其對地塞米松（Dex）的敏感性，繼而在臨床激素治療有效和無效的患者的血清中篩選出候選microRNA，體外實(shí)驗(yàn)評估其調(diào)控OF對Dex作用的影響，并在臨床患者血清中驗(yàn)證該microRNA作為治療前評估激素治療抵抗的預(yù)測價值。
　　在甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)實(shí)驗(yàn)中，在臨床標(biāo)本中分析成纖維細(xì)胞染色與良惡性、臨床分期的相關(guān)性。分離得到良惡性結(jié)節(jié)及結(jié)節(jié)旁的成纖維細(xì)胞，探討其表面標(biāo)志物在良惡性結(jié)節(jié)中的異同。體外實(shí)驗(yàn)建立腫瘤細(xì)胞和成纖維細(xì)胞間接共

4、培養(yǎng)模型，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)建立直接共培養(yǎng)模型，評估不同部位的成纖維細(xì)胞對于腫瘤形成及侵襲、轉(zhuǎn)移的促進(jìn)作用。
　　結(jié)果：
　　在體外高度炎癥環(huán)境下，GO的主要致病細(xì)胞OF直接對GC產(chǎn)生抵抗（Dex抑制率從69％降至28%，p＜0.01），而miR-885-5p和miR-224-5p可以恢復(fù)其敏感性(Dex抑制率28%vs.60%, p=0.03)。GO患者治療前的基線血清miR-885-5p水平（p=0.03）和眼裂寬度（p=0.03

5、6）是GC治療不敏感的獨(dú)立危險因素?；€血清miR-885-5p、miR-224-5p、TRAb和眼裂寬度一起構(gòu)成的模型可以有效預(yù)測對于GC治療不敏感的患者（NPV=100%）。
　　惡性甲狀腺結(jié)節(jié)的成纖維細(xì)胞多于良性結(jié)節(jié)（11450±1022 VS.3624±871.2，p＜0.0001），而在甲狀腺乳頭狀癌中活化成纖維細(xì)胞染色和臨床分期直接正相關(guān)（I、II期 vs. III、IV期，p=0.001）。在體外實(shí)驗(yàn)中，腫瘤相關(guān)成纖

6、維細(xì)胞(CAF)、癌旁成纖維細(xì)胞(NAF)都具有促進(jìn)腫瘤增殖的能力（2.5-4倍，p＜0.0001），而僅NAF顯著促進(jìn)腫瘤的侵襲（1.5倍，p＜0.01）。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)成纖維細(xì)胞促進(jìn)成瘤（p=0.03）、侵襲和轉(zhuǎn)移（6/22只 vs2/8只）,且NAF比CAF、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫來源成纖維細(xì)胞(GAF)作用更強(qiáng)。
　　結(jié)論：
　　miR-885-5p、miR-224-5p可以恢復(fù)GO對激素的敏感性，治療前循環(huán)miR-885-5