替加環(huán)素對(duì)臨床多重耐藥細(xì)菌體外抗菌活性及敏感性試驗(yàn)的方法學(xué)評(píng)估.pdf

1、目的：檢測(cè)替加環(huán)素對(duì)我院2012年臨床分離多重耐藥細(xì)菌的體外抗菌活性，為替加環(huán)素的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù);評(píng)估不同敏感性試驗(yàn)方法檢測(cè)替加環(huán)素對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌和肺炎克雷伯菌的體外藥敏結(jié)果，為臨床微生物實(shí)驗(yàn)室選擇替加環(huán)素的體外藥敏試驗(yàn)方法提供參考。
　　方法：回顧性分析我院2012年臨床分離的2264株常見(jiàn)多重耐藥細(xì)菌，采用Vitek-2 compact細(xì)菌分析系統(tǒng)檢測(cè)替加環(huán)素的體外敏感性，分析不同判定標(biāo)準(zhǔn)下替加環(huán)素的藥敏結(jié)果，數(shù)據(jù)分析

2、采用WHONET5.4軟件;選取2012年1月至3月臨床感染患者分離的50株耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌和49株肺炎克雷伯菌，采用微量肉湯稀釋法、Vitek-2法、MIC Test Strip(MTS)法及紙片擴(kuò)散法分別檢測(cè)替加環(huán)素對(duì)二種細(xì)菌的敏感性，并以微量肉湯稀釋法為參考方法，采用美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)及歐洲抗生素敏感性試驗(yàn)委員會(huì)(EUCAST)兩種判定標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估Vitek-2法、MTS法及紙片擴(kuò)散法與參考方法的一致性。

3、　　結(jié)果：(1)參照FDA/EUCAST判定標(biāo)準(zhǔn)，替加環(huán)素對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)、耐萬(wàn)古霉素腸球菌(VRE)的敏感率均為100％，MRSA和MRCNS的替加環(huán)素MIC50/90為0.125μg/ml，均低于萬(wàn)古霉素及利奈唑胺。(2)參照FDA/EUCAST判定標(biāo)準(zhǔn)，替加環(huán)素對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌、產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌的敏感率分別為99.8％/98.

4、4％、86.6％/67.8％、69.0％/35.7％。銅綠假單胞菌對(duì)替加環(huán)素MIC50/90均為8μg/ml。(3)50株CRAB采用微量肉湯稀釋法、Vitek-2法、MTS法測(cè)得替加環(huán)素MIC50/90分別為1μg/ml和2μg/ml、2μg/ml和4μg/ml、1.5μg/ml和3μg/ml，49株肺炎克雷伯菌采用微量肉湯稀釋法檢測(cè)替加環(huán)素MIC50/90分別為1μg/ml和2μg/ml，Vitek-2法、MTS法測(cè)得MIC50/9

5、0均為0.5μg/ml和1μg/ml。參照FDA/EUCAST判定標(biāo)準(zhǔn)，CRAB采用微量肉湯稀釋法、Vitek-2法、MTS法檢測(cè)替加環(huán)素敏感率分別為94.0％/70.0％、68.0％/28.0％、90.0％/44.0％，肺炎克雷伯菌對(duì)替加環(huán)素敏感率分別為91.8％/75.5％、91.8％/91.8％、91.8％/91.8％。紙片法采用四種不同判定標(biāo)準(zhǔn)，CRAB對(duì)替加環(huán)素敏感率為0～96.0％，肺炎克雷伯菌對(duì)替加環(huán)素敏感率為63.3％～

6、95.9％。(4)采用FDA判定標(biāo)準(zhǔn)，Vitek-2法和MTS法的檢測(cè)結(jié)果與參考方法的分類(lèi)一致率(CA)均高于EUCAST判定標(biāo)準(zhǔn)下的檢測(cè)結(jié)果;Vitek-2法檢測(cè)CRAB和肺炎克雷伯菌與參考方法的基本一致率(EA)分別為94.0％、95.9％，MTS法檢測(cè)CRAB和肺炎克雷伯菌與參考方法的EA為92.0％、83.7％;兩種方法均未出現(xiàn)重大誤差(VME)。(5)對(duì)于耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌，紙片法采用折點(diǎn)≥14 mm/≤10 mm，參考方

7、法采用FDA判斷標(biāo)準(zhǔn)，兩者一致性最好，CA最高(94.0％)，小誤差(mE)最低(2.0％)，出現(xiàn)2株VME。對(duì)于肺炎克雷伯菌，紙片法采用折點(diǎn)≥16 mm/≤12 mm，參考方法采用FDA判斷標(biāo)準(zhǔn)，兩者一致性最好，CA最高(98.0％)，mE最低(2.0％)，未出現(xiàn)VME。
　　結(jié)論：替加環(huán)素對(duì)除銅綠假單胞菌外的臨床常見(jiàn)多重耐藥菌均有良好的抗菌活性，對(duì)革蘭陽(yáng)性球菌抗菌活性最強(qiáng)。FDA判定標(biāo)準(zhǔn)比EUCAST標(biāo)準(zhǔn)更適用于臨床替加環(huán)素藥

8、敏結(jié)果判定，故建議實(shí)驗(yàn)室采用FDA判定標(biāo)準(zhǔn)。不同方法檢測(cè)替加環(huán)素藥敏結(jié)果不同，對(duì)于耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌，MTS法與微量肉湯稀釋法的一致性高于Vitek-2法;對(duì)于肺炎克雷伯菌，Vitek-2法與微量肉湯稀釋法的一致性高于MTS法;紙片擴(kuò)散法判定折點(diǎn)需根據(jù)不同的細(xì)菌做相應(yīng)的調(diào)整，對(duì)于耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌，以敏感≥14 mm/耐藥≤10mm為折點(diǎn)，與微量肉湯稀釋法的一致性最好;對(duì)于肺炎克雷伯菌，以敏感≥16 mm/耐藥≤12 mm為折點(diǎn)