骨髓來源的纖維細(xì)胞在特發(fā)性肺纖維化中募集及相關(guān)信號(hào)的研究.pdf

1、背景和目的
　　 特發(fā)性肺纖維化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis，IPF)是特發(fā)性間質(zhì)性肺炎(Idiopathic Interstitial Pneumonias，ⅡPs)中最常見的一種類型，近年來發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)。目前其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。IPF的病理特征是肺內(nèi)成纖維細(xì)胞(Fibroblast)/肌成纖維細(xì)胞（Myofibroblast）數(shù)量的擴(kuò)增與纖維化病灶(Fibroblastic Foci)

2、形成；肺內(nèi)纖維化病灶主要由肌成纖維細(xì)胞組成。國(guó)內(nèi)外研究認(rèn)為骨髓來源的纖維細(xì)胞(Fibrocytes)可能募集到纖維化病灶中并分化為肌成纖維細(xì)胞。它們共同表達(dá)普通的白細(xì)胞抗原CD45、造血干細(xì)胞抗原CD34、間充質(zhì)標(biāo)記物如膠原-1(Collagen-Ⅰ)、纖維結(jié)合素(Fibronectin)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、脯氨酰-4-羥化酶(prolyl-4-hydroxylase)等特有的細(xì)胞表面標(biāo)記物。大部分Fibrocytes都

3、表達(dá)趨化因子受體4(CXCR4)，并認(rèn)為CXCR4/CXCL12信號(hào)途徑對(duì)Fibrocytes的募集十分重要。目前關(guān)于其研究都是在體外或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物模型中進(jìn)行的，而在IPF患者中關(guān)于Fibrocytes促進(jìn)了肺纖維化形成的研究還未見相關(guān)報(bào)道。
　　 本次實(shí)驗(yàn)研究目的：①應(yīng)用雙重免疫熒光方法通過熒光顯微鏡分別觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中的Fibrocytes;②通過對(duì)各組Fibrocytes數(shù)量的比較，在肺纖維化形成過程中探討CXCR4/CX

4、CL12信號(hào)途徑對(duì)Fibrocytes募集的作用。旨在為Fibrocytes促進(jìn)肺纖維化形成的發(fā)病機(jī)制提供理論基礎(chǔ)；為更好的了解該病的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)歸及靶向治療提供分子生物學(xué)依據(jù)。
　　 材料與方法
　　 實(shí)驗(yàn)組20例，標(biāo)本來自河南省人民醫(yī)院行小切口開胸肺活檢，最終病理證實(shí)為IPF的住院患者。對(duì)照組20例，標(biāo)本來自河南省人民醫(yī)院與河南省胸科醫(yī)院因支氣管擴(kuò)張癥行肺葉切除術(shù)的患者，所取肺組織標(biāo)本距病變距離大于5cm，經(jīng)病理證實(shí)

5、為正常的肺組織。根據(jù)Fibrocytes所特有的不同的細(xì)胞表面標(biāo)記物，按不同組合分成四組：①CXCR4/Collagen-Ⅰ，②CD34/α-SMA，③CD34/Collagen-Ⅰ，④CD45RO/Collagen-Ⅰ。通過熒光顯微鏡分別觀察實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中Fibrocytes，分別計(jì)數(shù)四組中Fibrocytes數(shù)百分率，結(jié)果采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理，各組數(shù)據(jù)之間的比較分析分別采用Kruskal-Wallis test及M

6、ann-Whitneyu，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1.雙重免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組20例IPF患者中有19例肺組織發(fā)現(xiàn)Fibrocytes，而對(duì)照組中沒有發(fā)現(xiàn)。
　　 2.相關(guān)結(jié)果分析：本實(shí)驗(yàn)研究經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：通過熒光顯微鏡觀察并分別計(jì)數(shù)IPF患者肺組織中上述四組的Fibrocytes數(shù)百分率，分別為（5.19±0.0152％）、(2.19±0.0083％)、（2.56±0.0109％

7、）、（2.29±0.0082％）。①組分別與②組、③組、④組的數(shù)據(jù)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　 結(jié)論：
　　 1.該實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)組肺組織存在Fibrocytes，而在對(duì)照組中則未發(fā)現(xiàn)。提示Fibrocytes在IPF的形成和發(fā)展過程中可能促進(jìn)了肺纖維化形成。
　　 2.該實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在人類間質(zhì)性肺疾病中亦可能存在Fibrocytes。
　　 3.該實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)組肺組織能檢測(cè)