養(yǎng)陰抗毒膠囊2號(hào)對(duì)陰虛大鼠模型糖皮質(zhì)激素受體mRNA和蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模航⑼庠葱蕴瞧べ|(zhì)激素致陰虛證大鼠模型，探討?zhàn)B陰抗毒膠囊2號(hào)（YC2）對(duì)模型大鼠血清皮質(zhì)醇（CORT）水平、肝組織細(xì)胞核內(nèi)糖皮質(zhì)激素受體（GR）蛋白和mRNA水平的影響，探討?zhàn)B陰抗毒膠囊減輕激素副作用的機(jī)理。 實(shí)驗(yàn)方法： SD大鼠40只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、陰虛模型組（YD）、養(yǎng)陰抗毒膠囊2號(hào)組（YC2）、六味地黃丸組（LD）、桂附地黃丸組（GD）。在不同藥物干預(yù)后9天后處死，用放射免疫方法檢測(cè)各組血清皮質(zhì)醇（C

2、ORT）含量；免疫組織化學(xué)染色技術(shù)測(cè)定肝組織細(xì)胞核內(nèi)GR表達(dá)情況；RT-PCR測(cè)定肝組織糖皮質(zhì)激素受體mRNA水平。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 陰虛組大鼠與空白對(duì)照組相比，血清CORT含量明顯升高，說明模型建立成功（P<0.05）；養(yǎng)陰組、六味組大鼠血清CORT含量均不同程度低于陰虛組（P<0.05），提示兩者對(duì)外源性GC所致的陰虛大鼠模型血清CORT含量增高有一定的抑制作用。桂附組與陰虛組相比，CORT含量沒有差別（P>0.05），

3、提示GD對(duì)外源性GC所致的陰虛大鼠模型血清CORT含量增高沒有抑制作用。 免疫組化染色結(jié)果顯示，正常情況下GR在肝臟組織細(xì)胞核內(nèi)廣泛表達(dá)，免疫組化陽性反應(yīng)較強(qiáng)。陰虛組大鼠與正常組比較肝組織核內(nèi)GR蛋白表達(dá)減少（P<0.05）；而養(yǎng)陰組大鼠比陰虛組肝組織核內(nèi)GR蛋白表達(dá)增多（P <0.05），但仍較正常組略低（P<0.05）；六味組大鼠肝組織核內(nèi)GR蛋白表達(dá)較陰虛組增多（P<0.05），但與養(yǎng)陰組沒有區(qū)別（P>0.05）；桂附組大

4、鼠肝組織核內(nèi)GR蛋白表達(dá)較正常組減少（P<0.05），但較陰虛組略高，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。 將電泳后的凝膠置于Gel Doc 2000凝膠圖像分析系統(tǒng)分析，以PCR目的產(chǎn)物的光密度與GPDAH產(chǎn)物的光密度比值為最終結(jié)果。采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)光密度比值做單因素方差分析，結(jié)果如下：①空白組大鼠肝組織GR mRNA水平的比值為0.904±0.045，陰虛模型組的比值為0.621±0.027，為空白組GR mR

5、NA水平的比值的68.7％，GR mRNA水平降低（P<0.01），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②養(yǎng)陰組大鼠肝組織GR mRNA水平的比值為0.796±0.022，為空白組GR mRNA水平的比值的88.1％，比陰虛模型組提高了19.4％（P<0.01），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示養(yǎng)陰抗毒膠囊能夠提高陰虛大鼠肝組織GR mRNA水平。③六味組大鼠肝組織GR mRNA水平的比值為0.724±0.014，為空白組水平的80.1％，與陰虛模型組相比，提高了11.4

6、％（P<0.01），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與養(yǎng)陰組相比，比值下降8.0％(P<0.01)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示養(yǎng)陰藥物能夠提高陰虛大鼠肝組織GR mRNA水平，而且養(yǎng)陰抗毒膠囊比六味地黃丸更有效。④桂附組大鼠肝組織GR mRNA水平的比值為0.685±0.033, 為空白組的比值的75.8％，與陰虛模型組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），提示助陽藥對(duì)陰虛大鼠肝組織GR mRNA也有影響，但遠(yuǎn)不如養(yǎng)陰藥如養(yǎng)陰抗毒膠囊、六味地黃丸的影響大。