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文檔簡介
1、目的:
本實驗通過X射線照射制作放射性損傷的大鼠模型,觀察養(yǎng)陰抗毒膠囊(YC)及桂附地黃丸對大鼠腎組織中熱休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)與糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid receptor,GR)的表達影響,從而探討?zhàn)B陰抗毒膠囊對放射性損傷大鼠模型的保護性作用和機理,為臨床進一步應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
方法:
實驗1:觀察養(yǎng)陰抗毒膠囊對放射性損傷大鼠血象的影響<
2、br> 清潔級健康雄性SD大鼠40只(體質(zhì)量200±20g),隨機分為4組,即:正常對照組(A組,無照射),照射對照組(B組),放射+養(yǎng)陰抗毒組(C組)和放射+桂附地黃組(D組),每組10只。YC膠囊內(nèi)粉末進行再次粉碎,過100目篩,加入蒸餾水后超聲振蕩成200mg/mL的混懸液,A組前4天起給予2.5mL/日生理鹽水灌胃;B組,給予X射線照射,照射前4天起給予2.5mL/日生理鹽水灌胃;C組,照射前4天起給予2.5mL/日養(yǎng)陰抗毒膠
3、囊(主要成分:西洋參、羚羊角、石斛、生地、沙參、連翹、大薊、小薊、茜草、仙鶴草等)懸濁液灌胃;放射+桂附地黃組(D組),照射前4天起給予2.5mL/日桂附地黃丸(主要成分:肉桂、附子、熟地黃、山茱萸、牡丹皮、山藥、茯苓、澤瀉等)懸濁液灌胃,B、C、D組均一次性給予總劑量為6GyX射線照射。照射前4天起分別給予A、B組2.5mL/日生理鹽水灌胃;給予C組養(yǎng)陰抗毒膠囊懸濁液2.5mL/日灌胃(濃度0.2g/mL);給予D組桂附地黃丸懸濁液灌
4、胃2.5mL/日灌胃(濃度0.2g/mL)。A、B、C、D四組均連續(xù)灌胃10天。照射后第6天,用速眠新Ⅱ麻醉(軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所研制),單位用量8mL/kg,心臟內(nèi)采血檢測血常規(guī)。
實驗2:養(yǎng)陰抗毒膠囊對放射損傷大鼠腎組織中HSP70、GR表達的影響
模型復(fù)制如實驗1,照射后第6天,用速眠新Ⅱ麻醉(軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所研制),單位用量8mL/kg,心臟采血后,分別摘取腎組織提取蛋白,用蛋白印記法檢測
5、HSP70與GR的表達。
結(jié)果:
1、動物一般情況及血清中RBC、WBC、HGB值的檢測結(jié)果:
各組WBC、RBC計數(shù),HGB含量較A組大鼠顯著下降(P<0.01);C組大鼠被毛略有松散,進食和活動量較B組大鼠量多,較A組大鼠量少,WBC、RBC計數(shù),HGB含量與B組大鼠有顯著差異(P<0.05)。D組被毛脫落較B組少,且大便成形較軟,WBC、RBC計數(shù)與A組、B組比有顯著差異(P<0.05),與C組相比無
6、顯著差異(P>0.05)。反映6Gy重度造血型急性放射損傷模型造模成功。
2、對腎組織中HSP70與GR受體表達結(jié)果:
HSP70在放射對照組(B)、放射+養(yǎng)陰抗毒組(C)和放射+桂附地黃組(D)均有高表達,以B組最為明顯,D組其次,C組最弱,B組與A、C組相比有顯著差異性(P<0.01),C組與D相比也有統(tǒng)計學意義(P<0.05);GR在C組表達最明顯,其次在D組,B組最弱。B組與D組相比有統(tǒng)計學意義(P<0.05
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