養(yǎng)陰抗毒膠囊及拆方對陰虛大鼠垂體促腎上腺皮質(zhì)激素細(xì)胞和血清CORT,SOD,MDA的影響.pdf

1、目的：
　　本實(shí)驗(yàn)以氫化可的松造成陰虛大鼠模型，觀察養(yǎng)陰抗毒膠囊(YC)及拆方對陰虛大鼠垂體促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)細(xì)胞的免疫組織化學(xué)變化，以及對血清皮質(zhì)醇(CORT)，超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影響。探討YC對HPA軸抑制大鼠模型的作用和機(jī)理，為臨床進(jìn)一步應(yīng)用YC治療GC不良反應(yīng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)1：觀察養(yǎng)陰抗毒膠囊(YC)及拆方對陰虛大鼠垂體促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)細(xì)胞的

2、影響
　　清潔級健康雄性SD大鼠40只(體質(zhì)量200±20g)，隨機(jī)分為4組，即：正常對照組，陰虛模型組(YD)，養(yǎng)陰抗毒膠囊(YC)組和拆方抗毒組（大小薊、槐花），每組10只．YC膠囊內(nèi)粉末進(jìn)行再次粉碎，過100目篩，加入蒸餾水后超聲振蕩成5mg/mL的混懸液，拆方抗毒組顆粒劑在臨用前加入蒸餾水配制成濃度為5mg/mL的混懸液，YC、拆方抗毒組顆粒劑按成人劑量的25倍，7.5g/d，按平均200g/只計(jì)算，0.5g/只，用蒸餾水

3、稀釋至0.2g/ml.每天早晨給予2ml/d相應(yīng)的藥液灌胃，空白對照組及YD組給予2ml/d的蒸餾水灌胃，共3d。第4日起除空白對照組外，其余各組均按陰虛大鼠模型復(fù)制方法，每日17:00按50mg/kg劑量給予氫化可的松灌胃，連續(xù)4d，空白對照組給予2ml/d的蒸餾水灌胃，大鼠在造模結(jié)束ld后（第9日），各組同期斷頭處死，2min內(nèi)取出垂體，用4％多聚甲醛固定，石蠟包埋，按ABC法做ACTH免疫組化染色。
　　實(shí)驗(yàn)2：養(yǎng)陰抗毒膠囊

4、對陰虛大鼠CORT、SOD和MDA的影響
　　模型復(fù)制如實(shí)驗(yàn)一，各組均在造模結(jié)束ld后（第9日）08:00-09:00間，以Iml/kg劑量速眠新Ⅱ麻醉后心臟取血，測定血清SOD MDA、CORT的含量。SOD含量測定用黃嘌呤氧化酶比色法，MDA含量測定用硫代巴比妥鈉比色法，CORT含量用放射免疫法(RIA)。
　　結(jié)果：
　　1、ACTH細(xì)胞免疫組織化學(xué)觀察結(jié)果：
　　ACTH細(xì)胞多為不規(guī)則形，細(xì)胞核呈圓形，未

5、著色，ACTH陽性免疫物胞漿著色，替代對照未見陽性物質(zhì)。免疫組化染色結(jié)果顯示，對照組ACTH在垂體前葉內(nèi)廣泛表達(dá)，免疫組化陽性反應(yīng)較強(qiáng)，每個(gè)視野陽性細(xì)胞數(shù)比值95±27.3，YD組與空白對照組相比ACTH表達(dá)增多，每個(gè)視野陽性細(xì)胞數(shù)比值157±67.8(P<0.05)，提示陰虛模型建立成功。YC組較YD組ACTH表達(dá)減少，每個(gè)視野陽性細(xì)胞數(shù)比值102±37.5(P<0.05)，而拆方組無明顯差異，每個(gè)視野陽性細(xì)胞數(shù)比值145±47.8。

6、
　　2、對大鼠血清CORT，SOD和MDA結(jié)果：
　　YD組血清CORT含量明顯高于正常對照組(P<0.05)，說明動(dòng)物模型復(fù)制成功。YC組CORT含量低于YD組(P<0.05)，提示YC對外源性GC所致陰虛大鼠血清CORT亢進(jìn)有一定抑制作用，而拆方抗毒組無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，)；與正常對照組相比，YD組SOD活性明顯降低，MDA含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與YD組相比，YC組大鼠