人胚血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)及其與三維可降解乳酸與羥基乙酸共聚物(PLGA)細(xì)胞支架的親和性實(shí)驗(yàn).pdf

1、組織工程學(xué)[1,2]的興起為人類(lèi)修復(fù)器官缺損帶來(lái)了新希望,改變了以往“以創(chuàng)傷修復(fù)創(chuàng)傷”的傳統(tǒng)治療模式。不同領(lǐng)域的專(zhuān)家參與到這個(gè)新興具有革命意義的研究領(lǐng)域來(lái)。作為一種再生治療方式,組織工程能夠避免如器官移植所帶來(lái)的捐贈(zèng)短缺以及持久的免疫排斥等問(wèn)題。組織工程作為21世紀(jì)的一種新的組織再生治療方式正受到越來(lái)越廣泛的重視。
　　種子細(xì)胞、支架材料、細(xì)胞和材料的復(fù)合構(gòu)成了組織工程的三大要素[3]。平滑肌細(xì)胞是構(gòu)成人體管狀組織(如膽管、血管、

2、輸尿管等)的重要成分。本研究通過(guò)組織塊培養(yǎng)法成功培養(yǎng)人胚 VSMCs,并種植在可降解生物材料PLGA細(xì)胞支架(膜材和三維多孔材料上)上,考察人胚VSMCs與PLGA的細(xì)胞親和性及生長(zhǎng)情況,以期探討用可降解支架材料PLGA進(jìn)行構(gòu)建組織工程化膽管的可能。
　　第一部分
　　目的:為膽管組織工程的實(shí)驗(yàn)研究提供細(xì)胞來(lái)源,探索人胚VSMCs體外培養(yǎng)和保存方法。方法:從人工流產(chǎn)的胎兒主動(dòng)脈分離動(dòng)脈中膜平滑肌組織,應(yīng)用組織塊培養(yǎng)方法進(jìn)行人

3、胚 VSMCs培養(yǎng),完成鑒定工作;并將第四代的人胚VSMCs凍存,凍存2周、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月將細(xì)胞復(fù)蘇,觀察復(fù)蘇后人胚 VSMCs的生長(zhǎng)情況。結(jié)果:人胚VSMCs經(jīng)鑒定為人胚平滑肌細(xì)胞,培養(yǎng)的人 VSMCs經(jīng)冷凍保存,復(fù)蘇率超過(guò)80％。結(jié)論:人胚VSMCs體外培養(yǎng)及凍存復(fù)蘇成功,使人胚VSMCs培養(yǎng)體系更加完善,為組織工程化膽管及心血管疾病藥物的研究提供豐富的細(xì)胞來(lái)源。
　　第二部分
　　目的:探索體外培養(yǎng)的人胚 VS

4、MCs與經(jīng)過(guò)改性的乳酸與羥基乙酸共聚物的親和性及細(xì)胞在 PLGA上的生長(zhǎng)情況。方法:成功培養(yǎng)人胚VSMCs后,將其與 PLGA(膜材和三維材料)三維培養(yǎng),通過(guò)倒置顯微鏡、掃描電鏡和 MTT法觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況。結(jié)果:體外培養(yǎng)的人胚VSMCs生長(zhǎng)旺盛,且其與改性后的PLGA具有良好的相容性,細(xì)胞在PLGA上生長(zhǎng)良好。結(jié)果:改性后的PLGA與體外培養(yǎng)的人胚VSMCs有良好的相容性,為構(gòu)建結(jié)構(gòu)與功能與在體膽管平滑肌層相似的組織,最終形成組織工