全反式維甲酸對大鼠腎小管上皮細(xì)胞缺氧性損傷保護(hù)作用的體外研究.pdf

1、目的：探討全反式維甲酸(atRA)對大鼠腎小管上皮細(xì)胞缺氧性損傷的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：對大鼠腎小管上皮細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，根據(jù)研究需要分四組，分別為對照組、CoCl2刺激組、atRA刺激組以及COCl2與atRA共同刺激組，做如下檢測：用MTT檢測細(xì)胞活性，尋找atRA與CoCl2最適刺激濃度，用凝膠電泳遲滯分析法(EMSA)測定各組別細(xì)胞NFKB活性，用qRT-PCR和Western blotting分別檢測各組別細(xì)

2、胞NFκB亞單位p65、Scpep1以及VEGF mRNA與蛋白表達(dá)水平，用免疫共沉淀法檢測NFκB亞單位p65與Scpep1相互作用。
　　結(jié)果：atRA促進(jìn)NRK-52E細(xì)胞的生長和增殖。CoCl2刺激組中VEGF mRNA與蛋白水平的表達(dá)明顯高于對照組(P<0.05)。atRA和CoCl2共同刺激組中VEGF的mRNA蛋白水平表達(dá)明顯低于CoCl2組(P<0.05)。CoCl2刺激組p65 mRNA與蛋白水平的表達(dá)明顯高于對

3、照組(P<0.01)。共同刺激組p65的mRNA與蛋白水平表達(dá)明顯低于對照組(P<0.05)。CoCl2刺激組NFκB/DNA結(jié)合力明顯高于對照組(P<0.05)。而共同刺激組中NFκB/DNA結(jié)合力受到顯著抑制，與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。共同刺激組中Scpep1 mRNA與蛋白水平的表達(dá)水平顯著高于對照組(P<0.05)。與對照組比較，CoCl2刺激組中Scpep1的表達(dá)無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05