醋丁洛爾與美托洛爾對THP-1泡沫化細胞功能影響差別的實驗研究.pdf

1、目的:以THP-1細胞構建的人類巨噬細胞源性泡沫細胞模型為研究對象,并進一步探討具有內在擬交感活性的β腎上腺能受體阻滯劑醋丁洛爾和無內在擬交感活性的β腎上腺能受體阻滯劑美托洛爾,對人類巨噬細胞源性泡沫細胞模型功能影響的差別,從理論上探討兩種不同β受體阻滯劑在臨床應用中出現(xiàn)不同療效的原因。
　　方法:(1)以佛波酯和氧化型低密度脂蛋白誘導人的急性單核細胞白血病細胞株( THP-1細胞株),建立經典公認、穩(wěn)定可靠的人類巨噬細胞源性泡沫

2、細胞模型。(2)建立異丙腎上腺素組、美托洛爾+異丙腎上腺素組、醋丁洛爾+異丙腎上腺素組,根據(jù)實驗目的分別用不同濃度梯度的異丙腎上腺素、美托洛爾、醋丁洛爾處理THP-1細胞,從而形成相關組別的亞組。(3)應用Western Blot技術檢測各組THP-1細胞CCR2表達量的變化。應用ELISA技術檢測各組THP-1細胞MCP-1的量的變化。利用Transwell小室檢測不同藥物處理后THP-1細胞的遷移能力變化。
　　結果:

3、　　(1)以佛波酯和氧化型低密度脂蛋白誘導人的急性單核細胞白血病細胞株(THP-1細胞株),建立了經典公認、穩(wěn)定可靠的人類巨噬細胞源性泡沫細胞模型。
　　(2) Western Blot實驗結果表明:1)異丙腎上腺素組:異丙腎上腺素處理的THP-1細胞,CCR2的表達水平顯著高于空白對照組(P<0.05),且濃度越高,CCR2表達量越大,呈濃度依賴性;2)美托洛爾組:THP-1細胞經美托洛爾處理,可以降低同濃度異丙腎上腺素升高CC

4、R2表達的作用,且隨著美托洛爾濃度的增高,阻滯異丙腎上腺素升高CCR2表達的作用越強(P<0.05),呈濃度依賴性;3)醋丁洛爾組:經醋丁洛爾預處理的THP-1細胞,再用異丙腎上腺素處理CCR2的升高與只用異丙腎上腺素刺激引起的CCR2升高,沒有顯著性差異。且在同濃度的異丙腎上腺素刺激時,隨預處理的醋丁洛爾濃度升高,CCR2有升高趨勢,但三組間無顯著性差異(P>0.05)。
　　(3) ELISA實驗結果表明:1)異丙腎上腺素組:

5、異丙腎上腺素處理的THP-1細胞, MCP-1的水平顯著高于空白對照組(P<0.05),且濃度越高,MCP-1量越大,呈濃度依賴性;2)美托洛爾組:THP-1細胞經美托洛爾處理,可以降低同濃度異丙腎上腺素升高MCP-1的作用,且隨著美托洛爾濃度的增高,阻滯異丙腎上腺素升高MCP-1的作用越強(P<0.05),呈濃度依賴性;3)醋丁洛爾組:經醋丁洛爾預處理的THP-1細胞,再用異丙腎上腺素處理MCP-1的升高與只用異丙腎上腺素刺激引起的M

6、CP-1升高,沒有顯著性差異。且在同濃度的異丙腎上腺素刺激時,隨預處理的醋丁洛爾濃度升高,MCP-1有升高趨勢,但三組間無顯著性差異(P>0.05)。
　　(4) Transwell實驗表明:1)異丙腎上腺素組:異丙腎上腺素處理的THP-1細胞,細胞遷移能力較空白對照組顯著增強(P<0.05),且濃度越高,遷移能力越強,呈濃度依賴性;2)美托洛爾組:THP-1細胞經美托洛爾處理,可以降低同濃度異丙腎上腺素增強遷移能力的作用,且隨著

7、美托洛爾濃度的增高,阻滯異丙腎上腺素增強遷移能力的作用越強(P<0.05),呈濃度依賴性;3)醋丁洛爾組:經醋丁洛爾預處理的THP-1細胞,再用異丙腎上腺素處理遷移能力的增強與只用異丙腎上腺素刺激引起的遷移能力增強,沒有顯著性差異。且在同濃度的異丙腎上腺素刺激時,隨預處理的醋丁洛爾濃度升高,遷移能力有增強的趨勢,但三組間無顯著性差異(P>0.05)。
　　結論:異丙腎上腺素能夠上調THP-1細胞CCR2蛋白的表達,促進細胞MCP-