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文檔簡介
1、乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)是全世界最普遍也是最嚴重的傳染病之一。HBV是肝病毒科的成員之一,全基因組長度為3.2kb的部分雙鏈結構,它包含四個開放的閱讀框:S,C,P,X。其中P和X分別編碼對病毒復制至關重要的蛋白,Polymerase和HBx。其中Polymerase在以負鏈為模板延伸正鏈并進行修復形成cccDNA的過程中起到了重要作用。而HBx是一個多功能的調(diào)節(jié)蛋白,與肝癌的發(fā)生緊密相關。HBx的功能主要
2、涉及到轉(zhuǎn)錄,蛋白質(zhì)降解,信號傳導,細胞增殖,細胞周期,衰老,自噬和凋亡等。
為了能獲得在體內(nèi)研究HBV的致病機制及其活體的相關免疫機制,我們建立了HBV的果蠅模型,在這個模型里對HBV的靶蛋白HBx和Polymerase進行了過表達。首先,我們克隆了HBx和Polymerase的全序列,并連接到果蠅專用顯微注射載體pUAST中。然后,我們利用顯微注射技術獲得了轉(zhuǎn)基因果蠅。之后,我們把轉(zhuǎn)基因果蠅與相應的GAL4果蠅雜交使HB
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