一.傷寒桿菌質(zhì)粒pr,st98毒力基因spv的研究;二.乙型肝炎病毒hbx蛋白重組腺病毒載體的構(gòu)建

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文一.傷寒桿菌質(zhì)粒pR毒力基因spv的研究;二.乙型肝炎病毒HBx蛋白重組腺病毒載體的構(gòu)建姓名：焦旸申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：黃瑞20040401第二部分 乙型肝炎病毒H B x 蛋白重組腺病毒載體的構(gòu)建目的：構(gòu)建可表達(dá)I - I B x 蛋白的重組腺病毒載體，為研究H B x 與肝癌發(fā)生的關(guān)系提供有效的手段。方法：首先采用限制性核酸內(nèi)切酶從真核表達(dá)載體質(zhì)粒p C D N A 3 ．1 一H B x得

2、到H B x 基因；將H B x 基因與穿梭質(zhì)粒連接，得到含目的基因的重組穿梭質(zhì)粒；經(jīng)線性化后和腺病毒骨架質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化原核細(xì)胞，通過同源重組得到重組腺病毒質(zhì)粒載體；經(jīng)線性化后由脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞，可得到含有H B x 基因、能表達(dá)H B x 蛋白的重組病毒。并對(duì)重組病毒進(jìn)行病毒滴度測(cè)定。結(jié)果：本研究得到的重組腺病毒載體p A d H B x 經(jīng)轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞，能組裝并釋放完整的、具感染性的、可表達(dá)H B x 蛋白的重組腺病毒。以熒光計(jì)數(shù)