人參莖雙向電泳圖譜的建立及不同生長季節(jié)人參莖的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、人參生長在陰冷潮濕的東北山區(qū),在長期的生命進(jìn)程中,極易受到各種疾病的侵襲。人參莖部是人參最重要的支撐和輸導(dǎo)組織,同時(shí)還具有與人參根部相似的藥理學(xué)效用。研究表明,人參莖部病害隨著季節(jié)的變化有著不同的發(fā)病規(guī)律,而且人參莖藥理學(xué)活性成分的變化規(guī)律也與其生長季節(jié)的變化緊密相關(guān)。但人參莖隨季節(jié)變化的內(nèi)在致病機(jī)制和藥理學(xué)活性成分的合成規(guī)律尚不清楚。蛋白質(zhì)作為生命活動(dòng)規(guī)律調(diào)節(jié)的直接執(zhí)行者,是各種因素綜合作用于基因的最終表達(dá)結(jié)果。所以可利用蛋白質(zhì)組學(xué)技

2、術(shù)對(duì)不同季節(jié)人參莖的生命活動(dòng)規(guī)律展開直接有效的研究。
　　 人參莖含有大量纖維素和果膠等雜質(zhì),嚴(yán)重影響了人參莖的蛋白提取率。本文首先通過對(duì)人參莖蛋白提取率和粗蛋白除雜過程的優(yōu)化,得到了質(zhì)量較高人參莖的雙向電泳圖譜(2-DE)圖譜。然后比較了春、秋季節(jié)人參莖2-DE圖譜的差異,并對(duì)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF-TOF鑒定,所得Peaklist數(shù)據(jù)搜NCBInr庫,按蛋白功能對(duì)蛋白進(jìn)行分類和初步分析。最終發(fā)現(xiàn),春季人參莖表達(dá)量上

3、調(diào)的蛋白中,與能量代謝和生長物質(zhì)合成相關(guān)蛋白占很大比例,抗逆尤其抗病直接相關(guān)蛋白所占比例較小,而秋季人參莖表達(dá)量上調(diào)的蛋白中抗逆境尤其抗病直接相關(guān)蛋白占了很大比例,與能量代謝和物質(zhì)合成相關(guān)蛋白所占比例較小。顯示出春季人參莖細(xì)胞分裂與生長迅速,秋季人參莖的生長緩慢,但春季人參莖中抗逆尤其抗病直接相關(guān)蛋白的表達(dá)量卻較秋季低,這可能與春季人參莖較秋季人參莖更易感病有一定關(guān)聯(lián)。同時(shí)在春季人參莖中發(fā)現(xiàn)了兩種與異黃酮類、類苯基丙烷化合物物質(zhì)的合成相