腎炎康復(fù)片對糖尿病腎病大鼠腎組織Podocalyxin表達(dá)的作用研究.pdf

1、第一部分，糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)大鼠模型的建立 目的：建立DN模型，觀察大鼠一般狀況、腎組織Podocalyxin表達(dá)情況、血糖、24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮、及病理改變。 方法：45只雄性wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組、4周DN模型組和12周DN模型組，每組15只。應(yīng)用鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)右腎切除大鼠制備糖尿病腎病模型，測定2、4、6、8、12周末各組血糖及24小時(shí)尿蛋白

2、定量；4周末殺檢4周DN模型組、12周末分別殺檢正常對照組和12周DN模型組大鼠，應(yīng)用免疫熒光法和RT-PCR檢測腎組織Podocalyxin表達(dá)水平，通過全自動(dòng)生化儀檢測血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)，通過光鏡觀察腎臟病理變化。 結(jié)果：注射STZ3天后起，第2、4、6、8、12周末，各模型組大鼠血糖、24小時(shí)尿蛋白定量顯著高于正常對照組。4、12周末，各模型組大鼠Podocalyxin表達(dá)水平低于對照組(P＜0.05)。1

3、2周模型組Podocalyxin表達(dá)水平顯著低于4周模型組(P＜0.05)，BUN、Scr顯著高于4周模型組和正常組。病理觀察發(fā)現(xiàn)，4周末模型組大鼠腎小球結(jié)構(gòu)已出現(xiàn)DN早期特征性變化，包括腎小球肥大、腎小球基底膜增厚、系膜基質(zhì)增生，12周末上述病理表現(xiàn)進(jìn)一步加重。 結(jié)論：DN模型制作成功，為探討藥物干預(yù)治療作用及其機(jī)制奠定良好的模型基礎(chǔ)。 第二部分，腎炎康復(fù)片對DN大鼠腎組織Podocalyxin表達(dá)的作用研究

4、目的：觀察腎炎康復(fù)片對DN大鼠腎組織podocalyxin表達(dá)及大鼠血糖、24h尿蛋白定量、Scr、BUN及病理改變的影響。 方法：60只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組、DN模型組(模型組)、腎炎康復(fù)片治療組(中藥組)、氯沙坦鉀治療組(西藥組)，每組各15只。正常對照組給予等劑量麻醉藥，其余三組第按一部分方法造模，成模后中藥組每日每只灌胃腎炎康復(fù)片(600mg·kg-1·d-1)，西藥組每日每只灌胃氯沙坦鉀片(20mg·

5、kg-1·d-1)，正常對照組及模型組每日給予等量的蒸溜水。第2、4、6、8、12周末檢測各組大鼠血糖、24h尿蛋白定量，分別于12周末殺檢大鼠，通過免疫熒染色及RT-PCR檢測腎組織中Podocalyxin表達(dá)水平；通過光鏡觀察腎組織病理變化；全自動(dòng)生化分析儀測定Scr、BUN。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)第2、4、6、8、12周正常對照組大鼠血糖、24h尿蛋白定量均處于正常水平，12周末對照組腎組織中可見Podocalyxin表達(dá)，光鏡下腎

6、組織未見病理學(xué)變化，BUN、Scr均處于正常水平。同期的模型組、中藥組、西藥組大鼠podocalyxin蛋白表達(dá)均顯著低于正常對照組(P＜0.05)，腎組織病理損傷明顯，24h尿蛋白定量、BUN、Scr較正常對照組顯著增高(P＜0.05)。治療組大鼠腎組織podocalyxin蛋白表達(dá)顯著高于同期模型組(P＜0.05)，腎組織病理損傷較模型組明顯減輕。血糖水平略低于同期模型組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，24h尿蛋白定量、BUN、S