向日葵胰蛋白酶抑制劑SFTI-1在大腸桿菌中由內(nèi)含肽Intein介導(dǎo)的表達(dá).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、向日葵胰蛋白酶抑制劑（Sunflower Trypsin Inhibitor-1，SFTI-1）是Bowman-Birk抑制劑(BBI)蛋白家族中最小、最高效的抑制劑，是由14個(gè)氨基酸殘基首尾相連的天然環(huán)肽。SFTI-1除了對(duì)胰蛋白酶具有很強(qiáng)的抑制活性外，對(duì)凝乳酶和彈性蛋白酶也具有抑制效應(yīng)。以其9個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的結(jié)合環(huán)骨架(CTKSIPPIC)為模板研發(fā)新型高效抑制劑，已成為藥物研發(fā)的一個(gè)重要方向。SFTI-1的環(huán)狀骨架結(jié)構(gòu)及其高效的

2、胰蛋白酶抑制活性已經(jīng)引起研究人員越來越多的關(guān)注，嘗試采用各種方法來合成SFTI-1環(huán)狀多肽。
　　 傳統(tǒng)的固/液相合成方法制備環(huán)狀SFTI-1，因其成本高、反應(yīng)步驟繁多而使研究人員望而卻步。本課題嘗試采用Impact-pTwinl大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行環(huán)肽SFTI-1的制備。通過摸索不同表達(dá)條件，我們選定“37℃、溶氧35％、IPTG0.1mM、誘導(dǎo)時(shí)間4小時(shí)”為最適表達(dá)條件。由于內(nèi)含肽具有自身剪切的性質(zhì)，使我們利用殼多糖對(duì)獲得的

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