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文檔簡介
1、目的:探討HSP90α在食管癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用機制。
方法:使用細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)將siRNA-HSP90α轉(zhuǎn)染入CE81T-4細胞中,并分為實驗組、陰性對照組、空白對照組;并用RT-PCR和Western blot檢測3組細胞中HSP90αmRNA水平和蛋白質(zhì)水平的表達差異,驗證是否轉(zhuǎn)染成功。MTT法檢測3組細胞的增值活力,流式細胞術(shù)分析細胞周期、凋亡的改變,劃痕實驗和Transwell體外侵襲實驗檢測轉(zhuǎn)染后CE81T-4細胞
2、遷移和侵襲的變化。
結(jié)果:在siRNA-HSP90α成功轉(zhuǎn)染CE81T-4細胞后,RT-PCR檢測3組結(jié)果顯示,實驗組中HSP90αmRNA水平表達量顯著低于空白對照組和陰性對照組(P<0.05,P<0.05)。Western blot分析顯示實驗組HSP90α蛋白表達量降低,與空白對照組和陰性組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,P<0.05)。MTT實驗結(jié)果顯示,實驗組細胞的增殖能力明顯減弱,與其他兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意
3、義(P<0.05,P<0.05)。HSP90α基因表達沉默后,細胞凋亡率為32.67%,較空白對照組和陰性對照組明顯增加(P<0.05,P<0.05)。實驗組細胞周期被阻滯在G0/G1期。Transwell體外侵襲實驗顯示實驗組侵襲遷移的細胞個數(shù)為(76.4±8.7),顯著低于空白照組(140.3±5.8,P<0.05)與陰性對照組(129.3±10.1,P<0.05)。劃痕實驗結(jié)果顯示,72h后實驗組細胞的遷移力較其他兩組明顯降低。<
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