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1、研究背景:缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是缺氧條件下產(chǎn)生的一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,多數(shù)腫瘤具有缺氧的微環(huán)境,腫瘤形成過(guò)程中一個(gè)關(guān)鍵的步驟是對(duì)缺氧的適應(yīng),HIF-1就在這個(gè)過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。HIF-1廣泛存在于動(dòng)物及人體的多種腫瘤細(xì)胞中,其活性對(duì)維持腫瘤細(xì)胞的能量代謝,血管新生,促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移起到重要作用,因此成為腫瘤研究和治療的要靶點(diǎn)。 目的:檢測(cè)HIF-1α的基礎(chǔ)表達(dá)
2、,探討HIF-1α對(duì)人乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移能力影響。 方法:低氧刺激不同轉(zhuǎn)移能力的乳腺癌細(xì)胞系,觀察HIF-1α蛋白水平變化。采用RNA干擾技術(shù)把siRNA HIF-1α轉(zhuǎn)染人高轉(zhuǎn)移能力細(xì)胞系MDA-MB-231,G418篩選得到抗性克隆,經(jīng)低氧培養(yǎng)24h后,用western blot檢測(cè)HIF-1α蛋白水平的變化,用Matrigel穿膜侵襲實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組之間細(xì)胞侵襲和遷移運(yùn)動(dòng)能力的變化。 結(jié)果:
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