外源性骨橋蛋白對人大腸癌LS-174T細胞增殖、侵襲及相關(guān)基因表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過對大腸癌LS-174T細胞在人重組骨橋蛋白(rhOPN)刺激下增殖、侵襲及相關(guān)基因表達的體外實驗研究，探討骨橋蛋白在大腸癌中的作用。 方法：選擇納摩爾每升數(shù)量級的不同濃度rh0PN作用于人大腸癌LS-174T細胞，采用四甲基偶氮唑藍(MTT)試驗檢測細胞的增殖能力；重組人工基底膜實驗評價細胞侵襲能力；并運用實時定量RT-PCR，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)作為歸一化的管家基因，采用2-△△CT相對定量的方法，

2、分析細胞中尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)、基質(zhì)金屬蛋白酶．2(MMP-2)及血管內(nèi)皮生長因子(vEGF)mRNA表達的相對水平。 結(jié)果：1、LS-174T細胞經(jīng)納摩爾每升數(shù)量級的不同濃度rhOPN干預24h后，相對于未處理組，處理組的MTT值均升高(P＜0．01)，并呈劑量依賴關(guān)系。2、Transwell上室加入5nmol／L、30nmol／L的rh0PN的后，穿膜的LS—174T細胞數(shù)均多于對照組(P＜0．05)，并呈劑量依

3、賴關(guān)系。3、經(jīng)5nmol／L、30nmol／L的rh0PN處理24h后，LS-174T細胞的uPAmRNA及VEGFmRNA的表達升高(P＜0．05，P＜0．01)，而MMP-2mRNA表達差異無顯著性。 結(jié)論：rhOPN促進人大腸癌LS-174T細胞的增殖，并提高其侵襲能力。通過上調(diào)uPAmRNA的表達可能是rhOPN提高大腸癌LS．174T細胞的侵襲能力的分子機制之一，rhOPN上調(diào)LS-174T細胞VEGFmRNA的表達，

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