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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的:
腫瘤抑制基因Menl所編碼的蛋白稱為Menin,本文著重研究MenlmRNA和Menin在4種胃癌細(xì)胞株、胃粘膜上皮細(xì)胞株、胃癌原發(fā)灶及非腫瘤組織中的表達(dá)情況,探討其表達(dá)程度與胃癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移特征的相關(guān)性,為胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移機(jī)理研究提供新的思路和靶點(diǎn)。
研究方法:
(1)采用RT-PCR和Westernblotting法分別檢測(cè)4株胃癌細(xì)胞株(MKN-28、SGC-7901、BGC-823
2、及AGS)和胃粘膜上皮細(xì)胞株(GES-1)中MenlmRNA和Menin的表達(dá)情況;免疫熒光法檢測(cè)Menin在上述5種細(xì)胞中的定位表達(dá)。
(2)收集蘇州大學(xué)附屬第四醫(yī)院60例胃癌患者原發(fā)灶組織和非腫瘤組織,采用RT-PCR法檢測(cè)MenlmRNA的表達(dá)情況;并分析MenlmRNA的表達(dá)情況與其臨床病理特征之間的關(guān)系;采用Westernblotting和免疫組織化學(xué)法進(jìn)一步從蛋白水平檢測(cè)Menin的表達(dá)情況,并分析Menin的
3、表達(dá)情況與其臨床病理特征之間的關(guān)系。
研究結(jié)果:
(1)RT-PCR和Westernblotting法分別在基因和蛋白水平檢測(cè)MenlmRNA和Menin在4種不同分化程度的胃癌細(xì)胞株和胃粘膜上皮細(xì)胞株中的表達(dá)情況。結(jié)果表明MenlmRNA和Menin在4種胃癌細(xì)胞株中均有表達(dá),表達(dá)隨著分化程度從AGS、BGC-823、SGC-7901到MKN-28的增高而增高;與前4株胃癌細(xì)胞株相比,GES-1的表達(dá)顯著增
4、高(P<0.01)。免疫熒光檢測(cè)可見(jiàn)Menin主要在上述5種細(xì)胞株的細(xì)胞核內(nèi)表達(dá),但GES-1的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中也可見(jiàn)其表達(dá)。
(2)在60例胃癌患者中,胃癌原發(fā)灶組MenlmRNA和Menin的表達(dá)明顯低于非腫瘤組織組(P<0.05)。且MenlmRNA和Menin的低表達(dá)與胃癌的較晚臨床病理分期和伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移兩因素明顯相關(guān)(P<0.05),而與患者性別、年齡、分化程度、浸潤(rùn)深度無(wú)明顯的相關(guān)性(P>0.05)。
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