哈蟆油水溶性總蛋白的提取工藝及活性研究.pdf

1、目的：優(yōu)選哈蟆油水溶性總蛋白提取工藝，測定其理化性質(zhì)，并通過藥理實(shí)驗(yàn)研究其藥理活性，為我國特產(chǎn)名貴中藥材哈蟆油研究提供新的依據(jù)和技術(shù)支撐。
　　方法：以總蛋白得率為評價指標(biāo)，采用不同pH緩沖溶液、不同料液比、不同浸提時間、不同浸提次數(shù)、浸提液不同含鹽濃度的單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)優(yōu)選哈蟆油水溶性總蛋白的最佳提取工藝，并結(jié)合細(xì)胞增殖活性及抗氧化、抗疲勞藥理實(shí)驗(yàn)對其進(jìn)行性質(zhì)研究。
　　結(jié)果：
　　1、優(yōu)化后哈蟆油水溶性總蛋白的

2、提取工藝為：用pH為6.5，含鹽0.5 M的浸提液，以料液比1：100浸提哈蟆油原藥材3次，每次浸提時間為6 h。
　　2、驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明，最終哈蟆油水溶性總蛋白收率為9.97％以上，蛋白純度為86%，分子量主要分布在135 kDa、49 kDa、14 kDa及9 kDa左右。
　　3、細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)表明，哈蟆油水溶性總蛋白對L-929、Vero及ChL細(xì)胞增值具有促進(jìn)作用，而對3T3細(xì)胞增值具有抑制作用，且活性呈現(xiàn)一定量效

3、關(guān)系。
　　4、抗氧化實(shí)驗(yàn)表明，哈蟆油水溶性總蛋白能夠提高肝臟與血清中超氧化物歧化酶（SOD）含量，并能顯著降低肝臟與血清中過氧化脂質(zhì)（MDA）含量。
　　5、抗疲勞實(shí)驗(yàn)表明，哈蟆油水溶性總蛋白可延長小鼠負(fù)重游泳時間，降低血清尿素氮含量，顯著增加肝糖原含量和降低血乳酸含量，但對小鼠的體重?zé)o明顯影響。
　　結(jié)論：
　　1、采用本實(shí)驗(yàn)優(yōu)選的提取工藝，哈蟆油水溶性總蛋白收率及純度較高。
　　2、哈蟆油水溶性總蛋白