肌纖維母細(xì)胞在肺間質(zhì)維化中的作用.pdf

1、目的:通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，從器官病理、超微病理、細(xì)胞水平研究肌纖維母細(xì)胞，以探討肌纖維母細(xì)胞在肺纖維化發(fā)病中的作用及意義。 方法:健康Wistar大鼠64只，隨機(jī)分為2組：對(duì)照組和模型組，每組32只。模型組經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素(bleomycin，BLM)誘導(dǎo)肺纖維化，對(duì)照組氣管內(nèi)灌注生理鹽水代替。各組動(dòng)物均于氣管內(nèi)灌藥后3、7、14、28天分別處死8只大鼠，測(cè)動(dòng)物體重及肺濕重，計(jì)算肺系數(shù)(肺濕重mg/體重g)；取肺組織做蘇木精-伊紅

2、(haematoxylin-eosin，HE)染色、Van Gieson氏膠原纖維(VG)染色和制備電鏡標(biāo)本，并進(jìn)行體外培養(yǎng)大鼠肺成纖維細(xì)胞。HE染色觀察肺組織結(jié)構(gòu)的病理改變；VG染色觀察肺組織膠原纖維的表達(dá)情況；透射電鏡觀察肺組織的超微結(jié)構(gòu)的改變。免疫組化方法測(cè)定α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)和I型膠原(Type I codagen，∞l-I)的表達(dá)水平；免疫細(xì)胞化學(xué)方法測(cè)定培養(yǎng)的成纖維細(xì)

3、胞α-SMA表達(dá)水平。 結(jié)果:與對(duì)照組相比，模型組大鼠的肺系數(shù)值均顯著增高(P<0.05)；a-SMA、∞l-I在正常對(duì)照組大鼠肺組織中呈弱表達(dá)，在模型組大鼠肺組織中呈較高表達(dá)(P<0.05)；模型組大鼠細(xì)胞培養(yǎng)爬片測(cè)定α-SMA表達(dá)水平顯著增高(P<0.05)；光鏡下，HE染色顯示模型組大鼠的肺組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，肺泡間隔增寬，炎性細(xì)胞滲出，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，融合，形成纖維灶；VG染色顯示模型組大鼠膠原纖維大量表達(dá)；電鏡下，肺組織超