主動外排系統AcrAB-TolC介導的大腸桿菌多重耐藥性的研究.pdf

1、大腸桿菌是畜禽的主要致病菌。大腸桿菌對多種抗生素耐藥主要與菌體中存在的主動外排系統(外排泵)有關。一般認為AcrAB-TolC外排泵是最主要的外排泵。它的作用底物十分廣泛，能夠排出多種抗生素、化療試劑、洗滌劑和染料類，它的高水平表達，表現出對多種化合物的耐受甚至高水平耐受。 從山東省不同地市多家雞場分離出176株雞源大腸桿菌，按NCCLS推薦的紙片擴散法測定了其對20種抗菌藥物的敏感性。結果表明，細菌耐藥性嚴重，以多重耐藥為主，

2、75％的分離菌耐受多于9種抗菌藥物。從中選擇6株不同耐藥水平的多重耐藥大腸桿菌，采用平皿二倍稀釋法對其進行最低抑菌濃度測定，結果表明多重耐藥的水平相當嚴重。 應用瓊脂稀釋法檢測大腸桿菌質控株和耐藥株在加入主動外排抑制劑碳酰氰間氯苯腙(CCCP)后對環(huán)丙沙星、恩諾沙星、四環(huán)素的最低抑菌濃度(MIC)變化情況，以此探討耐藥大腸桿菌中是否存在主動外排系統。結果顯示：在加入CCCP后，大腸桿菌質控株對三種抗菌藥物的MIC無變化，多數耐藥

3、株對四環(huán)素MIC變化不大，而CCCP可使耐藥株分別對環(huán)丙沙星和恩諾沙星的MIC變化較大，其中耐藥菌S26對這兩種藥物的MIC均減小8倍。 研究環(huán)丙沙星和恩諾沙星在臨床耐藥株及質控株ATCC25922中的蓄積動力學及能量抑制劑酰氰間氯苯腙CCCP(Carbonglcyanidem-chlorlpheyhydrazone)的影響。結果表明，CCCP的作用不同程度地增加了耐藥株和質控株ATCC25922對環(huán)丙沙星、恩諾沙星的攝入量。在

4、質控株ATCC25922，不論有無CCCP的存在，菌體內環(huán)丙沙星、恩諾沙星的濃度隨攝取時間而遞增且保持較耐藥株高的穩(wěn)態(tài)濃度；在耐藥株S9、S26和S124當有CCCP存在時菌體內喹諾酮類藥物濃度隨攝取時間而遞增且保持較無CCCP存在時明顯高的穩(wěn)態(tài)濃度；但耐藥株S5和S77加入CCCP后菌體內藥物的累積量變化不大。 通過RT-PCR檢測了標準株和臨床分離耐藥株的AcrA的mRNA，分析了受試菌的耐藥水平與AcrA的mRNA水平的相