化學(xué)酶法合成RGD三肽的研究.pdf

1、近年來,基因工程、蛋白質(zhì)工程和酶工程技術(shù)的迅速發(fā)展,以及分離純化與檢測(cè)手段的現(xiàn)代化,大大加快了發(fā)現(xiàn)新活性多肽的速度.研究與開發(fā)具有生物活性或藥物活性的肽類,包括其前體肽片段的合成,已成為國(guó)際高新技術(shù)領(lǐng)域競(jìng)爭(zhēng)的一個(gè)重要部分.該文的目的是對(duì)RGD三肽的合成工藝和路線進(jìn)行初步的探討,研究液相化學(xué)法(DCC法、混合酶酐法、氨解取代等)合成GD二肽、RGD三肽的實(shí)驗(yàn)過程中多種縮合劑、成酐試劑的作用機(jī)制,并研究多種因素影響肽合成的程度,積累相關(guān)數(shù)據(jù)

2、,從而為RGD三肽的規(guī)模化制備提供理論基礎(chǔ)和必要的技術(shù)常數(shù).該文以DCC法、混合酸酐法分別合成了IICl·Gly-Asp(oBzl)<,2>二肽產(chǎn)物和Z-Arg(Tos)- Gly-Asp(oBzl)<,2>三肽產(chǎn)物,以酰氯合成(氨解取代)法合成了Gly-Asp(NH<,2>)<,2>二肽產(chǎn)物;研究了多中因素包括反應(yīng)時(shí)間、溶劑種類、底物配比以及堿加入量等對(duì)化學(xué)合成RGD序列肽的影響.堿的加入量具體指三乙胺和N-甲基嗎啡啉,不同的反應(yīng)中加

3、入的目的和作用各不相同.另外在實(shí)驗(yàn)過程中嘗試?yán)秘i胰脂肪酶(PPL)和胰蛋白酶(trypsin)分別合成三肽產(chǎn)物(ZArg(Tos)Gly-Asp(NH<,2>)<,2>以及Z-Arg(Tos)- Gly-Asp(oBzl)<,2>.并對(duì)其合成機(jī)理,影響因素進(jìn)行了初步的討論,重點(diǎn)研究了反應(yīng)時(shí)間、試劑種類,水加入量等因素對(duì)酶促反應(yīng)的影響.由于實(shí)驗(yàn)室硬件的限制加上時(shí)間有限,我們并未得到預(yù)期的效果.酶促肽類合成的優(yōu)勢(shì)遠(yuǎn)沒有發(fā)揮出來,這也是將我