TLR4及MyD88在大鼠局灶性腦缺血耐受過程中的表達及作用.pdf

1、前言:
　　 大部分的神經(jīng)外科手術(shù)都會給患者帶來腦缺血性的副損傷,給手術(shù)預后造成極大的影響。為解決這一難題,人們在研究中發(fā)現(xiàn)短暫腦缺血、缺氧、內(nèi)毒素、促炎癥細胞因子等因素預處理動物模型可誘導動物腦細胞產(chǎn)生耐受效應。預處理耐受即為事先給予少于致死量藥物或造成較輕微的炎癥反應,從而緩解接下來的致死損傷,產(chǎn)生一定的腦保護效應。據(jù)現(xiàn)有研究表明,這種耐受效應的產(chǎn)生與外界的刺激的性質(zhì)有很大關系,如腦缺氧預處理可通過細胞內(nèi)線粒體結(jié)構(gòu)改變調(diào)整自

2、身能量儲備,從而減少了損傷性的腦缺氧傷害,預先給予動物小劑量刺激后將明顯降低致死劑量的所造成的動物死亡率[1]。依照同樣原理造成短時間人為缺血損傷構(gòu)造預缺血模型發(fā)現(xiàn)預處理還可誘使機體產(chǎn)生缺血耐受,可建立耐受狀態(tài)保護大腦免受致死性的缺血損傷[2]。在這些預處理實驗中共同檢測到了TLR4下調(diào)表達引起了人們的關注。本實驗立足現(xiàn)有研究成果為基礎,進一步探討預先給腦組織一個小劑量的缺血再灌注損傷后是否對腦組織再次面臨致死性缺血再灌注損傷時起到保護

3、作用,并進一步探討TLR4蛋白在這種保護性作用機制中所起到的功能。
　　 材料與方法:
　　 按文獻所述,建立ZeaLonga改良法大鼠大腦中動脈線栓法預缺血處理模型。健康成年SD大鼠(中國醫(yī)科大學實驗中心提供)60只(體重220-250克,雄性),隨機分成3組:A.對照組(n:20只),B.損傷性缺血再灌注組(n=20只),C.缺血預處理組(n=20只)。C組為大腦中動脈線栓15min,A,B組做假手術(shù)處理,共同飼養(yǎng)4

4、8小時后B,C組做損傷性缺血再灌注90min,A組做假手術(shù)處理,三組分別于處理后12h、24h處死大鼠。處死大鼠取出鼠腦后做鼠腦冠狀切片TTC染色,余組織采用westernblot方法進行分析蛋白表達。
　　 結(jié)果:
　　 大鼠腦缺血模型建立成功。通過干濕法進一步檢測大鼠各組間腦水腫程度分析,我們可以檢測到經(jīng)過預缺血再灌注的大鼠腦組織,再次面臨致死性缺血再灌注傷害時其水腫程度明顯降低。通過各組大鼠各不同時間點對鼠腦TLR