TLR4-MyD88在AngⅡ誘導(dǎo)心肌肥厚中的作用研究.pdf

1、目的：
　　檢測(cè)TLR4、MyD88在AngⅡ誘導(dǎo)的心肌肥大細(xì)胞中的表達(dá)情況，同時(shí)觀察心肌細(xì)胞的炎癥因子（IL-1β、TNF-α）以及心肌肥厚標(biāo)志物ANP、BNP、β-MHC mRNA的表達(dá)。TLR4抑制劑TAK242能否抑制AngⅡ誘導(dǎo)的心肌肥厚及減輕炎癥反應(yīng)，探討AngⅡ誘導(dǎo)的心肌肥厚的分子機(jī)制，指導(dǎo)心肌肥厚及心力衰竭的治療。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)分組：
　　SPF級(jí)別C57BL/6品系周齡8-10周雄性

2、小鼠（體重20-25g），共21只，將其隨機(jī)分為3組，每組7只：血管緊張素(AngⅡ)埋泵組，血管緊張素(AngⅡ)埋泵+抑制劑TAK242組，生理鹽水埋泵組。
　　2.AngⅡ誘導(dǎo)小鼠心肌肥厚及TLR4抑制劑TAK242干預(yù)：
　　AngⅡ(1.3mg/kg/day)埋泵建立心肌肥厚模型、AngⅡ埋泵組每周腹腔注射抑制劑TAK2422次、及生理鹽水埋泵組作為對(duì)照。共飼養(yǎng)4周。
　　3.心臟小鼠取材：
　　4周后

3、解剖獲取小鼠心臟并稱重(HW)、稱量小鼠體重(BW)、測(cè)量左側(cè)脛骨長(zhǎng)度(TL)，液氮速凍，存于-80°冰箱。
　　4.提取心肌細(xì)胞總RNA行RT-qPCR：
　　檢測(cè)心肌肥厚指標(biāo)ANP、BNP、β-MHC，同時(shí)檢測(cè)TLR4、Myd88以及炎癥因子IL-1β、TNF-α的mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.HW/BW與HW/TL的比較
　　AngⅡ埋泵組與生理鹽水埋泵組比較，心臟重量(HW)/小鼠體重(B

4、W)及心臟體重(HW)/脛骨長(zhǎng)度(TL)顯著增大，P＜0.01，用TAK242干預(yù)AngⅡ埋泵組后，心臟重量(HW)/小鼠體重(BW)及心臟體重(HW)/脛骨長(zhǎng)度(TL)比值明顯變小，P＜0.01。
　　2.心肌肥厚標(biāo)志物的表達(dá)。
　　AngⅡ埋泵組比生理鹽水埋泵組比較，心肌肥厚標(biāo)志物ANP、BNP、β-MHC顯著增大，P＜0.01，與AngⅡ埋泵+抑制劑TAK242組比較，有顯著差異，P＜0.01
　　3.炎癥因子I

5、L-1β、TNF-αmRNA的檢測(cè)。
　　AngⅡ埋泵組比生理鹽水埋泵組比較，炎癥因子表達(dá)增加，P＜0.01，與AngⅡ埋泵+抑制劑TAK242組比較，表達(dá)減少，有顯著差異，P＜0.01。
　　4.TLR4、MyD88mRNA的檢測(cè)。
　　AngⅡ埋泵組比生理鹽水埋泵組比較，TLR4、MyD88mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)，P＜0.01，與AngⅡ埋泵+抑制劑TAK242組比較，有顯著差異，P＜0.01。
　　統(tǒng)計(jì)學(xué)：<