RECK基因與肝纖維化發(fā)展、逆轉(zhuǎn)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：以SD大鼠四氯化碳中毒性肝纖維化模型為研究對象，了解肝組織RECK基因、基質(zhì)金屬蛋白酶-2的活性在肝纖維化發(fā)展及逆轉(zhuǎn)過程中的動態(tài)變化，揭示RECK基因表達與肝纖維化程度以及與基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）活性之間的相關(guān)性。
　　 方法：SD雄性成年大鼠（重量為140±10g）65只隨機分為A，B兩組：A組5只為肝纖維化對照組，每周2次純花生油皮下注射，劑量為3 m1·kg-1，于第8周末處死。B組60只為肝纖維化組，用C

2、Cl4皮下注射建立大鼠肝纖維化模型，每周2次用50％CCl4油溶液皮下注射，劑量為3 ml·kg-1，并于第1、2、4、6、8周末分別處死4只動物，留取肝組織備用。B組剩余40只隨機分為C、D兩組：C組20只為肝纖維化進展組，繼續(xù)行相同劑量的50％CCl4油溶液皮下注射，仍然是每周兩次：D組20只為肝纖維化自然逆轉(zhuǎn)組，停用CCl4，改為每周2次純花生油皮下注射，劑量為3 ml.kg-1。在實驗8周后第2、7、14、28天兩組各處死5只動

3、物，并留取肝組織備用。處死時測量肝重指數(shù)（即肝重/體重比值），肝組織常規(guī)HE染色檢測造模是否成功以及判斷脂肪變性的程度，天狼猩紅染色判斷肝纖維化程度，明膠酶譜法檢測肝組織MMP-2的活性，RT-PCR法檢測RECK基因mRNA表達水平，免疫組織化學(xué)染色了解肝組織RECK蛋白表達情況。
　　 結(jié)果：①在大鼠肝纖維化形成的早期和中期，肝脂肪變性逐漸加重，肝重指數(shù)逐漸升高；晚期逐漸減輕或下降；肝纖維化逆轉(zhuǎn)過程中肝脂肪變性減輕、肝重指數(shù)

4、下降更加明顯。②在肝纖維化發(fā)展過程中，肝組織RECK表達隨肝纖維化程度的加重而逐漸下降，MMP-2活性逐漸升高；逆轉(zhuǎn)過程中，RECK表達水平逐漸升高，MMP-2活性逐漸下降。③RECK表達水平和肝纖維化程度呈負相關(guān)（r=-0.56931，P<0.05），而MMP-2活性與纖維化程度呈正相關(guān)（r=0.93715，P<0.05）。④不論是在肝纖維化發(fā)展階段還是在逆轉(zhuǎn)過程中，RECK表達水平和MMP-2活性均呈負相關(guān)（形成過程中r=-0.69