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1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文siRNA對(duì)肝癌細(xì)胞中異常表達(dá)FAT10基因的抑制效應(yīng)研究姓名:劉天德申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):外科學(xué)(普外)指導(dǎo)教師:邵江華20090601AbstractABSTRACTObjective:DesignandselectsiRNAsequencesthatcouldinhibittheexpressionofubiquitin—relatedproteinFAT10ThentransfectthesiRNAi
2、ntoHep3BcellsbyLipofectamineTM2000andresearchtheeffectandsignificanceonbiologicalbehaviorofhepatomacarcinomacellsMethods:1FoursiRNAsequencesweredesignedandtransfectedintoHep3BcellsThetendencyofFATl0expressionwasestimated
3、usingRTPCR,Real—TimePCRSelectthebestsiRNAandthebestinterferingcondition2AgaintransfectthebestsiRNAintoHep3BcellsviathebestinterferingconditionImmunocytochemicalmethodWasusedtodetectthechangeofFAT103TodetecttheinfluenceOi
4、lbiologicalbehaviorofHep3BaftertransfectionTheeffectoncellgrowthWasdetectedbyMTTandtheeffectonthechangeofcellcycleWasanalyzedbyflowcytometrywhenFAT10WasdegradedbysiRNAResults:1Transfectionefficiencywasdemonstratedhighbyo
5、bservingthegreenfluorescencethroughfluorescencemicroscope2TheexpressionofFAT10WasdegradedobviouslybythedetectionofRTPCR,Real—TimePCRandimmunocytochemicalmethod3ThecellgrowthabilityofHep3BcellsWasmarkedlyinhibitedfollowin
6、gFAT10mRNAdegradedbysiRNAtransfectionHep3BcellsweremainlydetainedinGo/GlandthepercentageofSandG2/MWasdecreasedConclusion:siRNAcaneffectivelyinhibitabnormalexpressionofFATIOaswellasgrowthofHep3BFAT10mayplayanimportantrole
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