復(fù)健片保護(hù)缺血性卒中血腦屏障的作用研究.pdf

1、目的:探討滋補(bǔ)肝腎中藥復(fù)健片對(duì)缺血性卒中后血腦屏障的保護(hù)機(jī)制。方法:基于“腎生髓”的中醫(yī)理論,以大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)觀察復(fù)健片調(diào)控血腦屏障通透性和結(jié)構(gòu)的研究,初步探索滋補(bǔ)肝腎中藥保護(hù)血腦屏障的機(jī)制。利用滲出血管外的依文氏藍(lán)(EB)染色法,以依文氏藍(lán)含量為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)血腦屏障通透性的影響;以腦組織含水量為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)腦水腫的影響;利用酶聯(lián)免疫法,以組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)血

2、腦屏障基膜損傷的纖溶酶系統(tǒng)的影響;利用酶聯(lián)免疫法,以基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)血腦屏障基膜損傷的明膠酶系統(tǒng)的影響;利用原位雜交法,以內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)ET-1 mRNA、ecNOS mRNA和P-gp mRNA為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞功能活性的影響;利用放免法,以環(huán)磷酸腺苷(cAMP)和環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響;利用酶聯(lián)免疫法,以腫瘤壞死因子-α

3、(TNF-α)和白介素10(IL-10)為指標(biāo),觀察復(fù)健片對(duì)炎性細(xì)胞因子的影響。結(jié)果:復(fù)健片可顯著降低血腦屏障的通透性,減輕腦水腫;抑制t-PA、MMP-2和MMP-9的表達(dá),防止血腦屏障的基膜損傷;抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)病理性上調(diào)的ET-1 mRNA表達(dá),增強(qiáng)ecNOS mRNA、P-gp mRNA表達(dá)以保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞;降低cGMP表達(dá)、提高cAMP,有促使星形膠質(zhì)細(xì)胞協(xié)同誘導(dǎo)維持血-腦屏障特性的作用;降低TNF-α含量,提高IL-10含量