轉(zhuǎn)染KCNMA1的骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療大鼠糖尿病性勃起功能障礙的研究.pdf

1、目的：將KCNMA1基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)移植到糖尿病性勃起功能障礙大鼠的陰莖組織內(nèi)，研究其對大鼠勃起功能的影響。
　　方法：慢病毒轉(zhuǎn)染BMSCs后，RT-PCR和Western blot檢測細胞KCNMA1的表達;成骨、成脂肪分化液誘導(dǎo)BMSCs分化，化學(xué)染色觀察分化結(jié)果。腹腔注射鏈脲佐菌素和頸部皮下注射阿樸嗎啡，建立糖尿病性勃起功能障礙大鼠模型。根據(jù)大鼠陰莖組織中注射的細胞不同，隨機分為4組:Ⅰ組:KCN

2、MA1轉(zhuǎn)染BMSCs組;Ⅱ組:空載體轉(zhuǎn)染BMSCs組;Ⅲ組:單純BMSCs組;Ⅳ組:PBS對照組;正常大鼠作為正常對照。細胞移植后，用熒光顯微鏡觀察陰莖組織中移植的BMSCs分布定植情況;通過陰莖海綿體內(nèi)壓的測定反映陰莖勃起功能變化;免疫組化檢測大鼠陰莖組織中KCNMA1的表達。
　　結(jié)果：(1) RT-PCR和Western blot結(jié)果表明體外成功將KCNMA1重組慢病毒轉(zhuǎn)染入BMSCs，且KCNMA1過表達。(2)成骨成脂分

3、化結(jié)果表明經(jīng)過慢病毒轉(zhuǎn)染的BMSCs仍然具有多向分化能力。(3)大鼠陰莖海綿體內(nèi)壓測定表明:Ⅰ組大鼠勃起功能改善較Ⅱ組和Ⅲ組明顯，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。(4)熒光顯微鏡觀察提示:BMSCs移植后3天陰莖組織中可見大量綠色熒光細胞，2周后綠色熒光細胞熒光變?nèi)?，但大多位于海綿體血竇及血管內(nèi)膜上。(5)免疫組化結(jié)果提示Ⅰ組大鼠陰莖組織中KCNMA1的表達明顯高于其他組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：轉(zhuǎn)