番茄紅素對(duì)慢性鐵負(fù)荷大鼠氧化應(yīng)激及肝細(xì)胞自噬的影響.pdf

1、目的:
　　 探討番茄紅素對(duì)慢性鐵負(fù)荷大鼠氧化應(yīng)激及肝細(xì)胞自噬的影響。
　　 方法:
　　 36只清潔級(jí)健康雄性SD大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照（基礎(chǔ)飼料，鐵含量為50 mg/kg），慢性鐵負(fù)荷（高鐵飼料，鐵含量為1000 mg/kg），番茄紅素空白對(duì)照（基礎(chǔ)飼料，番茄紅素灌胃劑量為15 mg/kg），慢性鐵負(fù)荷+番茄紅素高劑量(高鐵飼料，番茄紅素灌胃劑量為20 mg/kg)，慢性鐵負(fù)荷+番茄紅素中劑量（高鐵飼料

2、，番茄紅素灌胃劑量為15 mg/kg），慢性鐵負(fù)荷+番茄紅素低劑量（高鐵飼料，番茄紅素灌胃劑量為10 mg/kg）六組，每組6只。持續(xù)飼喂6周后，取血和肝、腎、脾、心和結(jié)腸組織測(cè)定鐵含量，總鐵結(jié)合力。同時(shí)，氧化應(yīng)激測(cè)定指標(biāo)包括血清和組織中MDA、T-SOD、CAT、GST，嚴(yán)格按照各自試劑盒說明書處理樣本后，在酶標(biāo)儀532、550、405、415nm處測(cè)定吸光度（A值）。組織學(xué)染色、透射電鏡和免疫組織化學(xué)觀察肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、自噬以及ca

3、spase-3凋亡蛋白、Ki-67細(xì)胞增殖抗原、LC3-B微管相關(guān)蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:
　　 與空白對(duì)照組比較，慢性鐵負(fù)荷組大鼠血清鐵含量增加極為顯著(P＜0.01)，總鐵結(jié)合力下降極為顯著(P＜0.01);肝和結(jié)腸組織中鐵含量顯著增加（P＜0.05）。與慢性鐵負(fù)荷組比較，飼喂中劑量和高劑量的番茄紅素中動(dòng)物血清鐵含量顯著下降(P＜0.05)，總鐵結(jié)合力顯著增加(P＜0.05);結(jié)腸組織鐵含量顯著下降(P＜0.0

4、5)，飼喂中、高劑量番茄紅素肝組織鐵含量顯著下降(P＜0.05)。與空白對(duì)照組比較，慢性鐵負(fù)荷組肝和結(jié)腸組織MDA含量顯著增加(P＜0.05)，肝組織T-SOD活性增加極為顯著(P＜0.01)，而結(jié)腸組織T-SOD活性下降極為顯著(P＜0.01)。與慢性鐵負(fù)荷組比較，慢性鐵負(fù)荷+番茄紅素低、中、高劑量組肝組織MDA含量顯著下降(P＜0.05)，結(jié)腸和腎組織T-SOD活性增加極為顯著(P＜0.05)。與空白對(duì)照組比較，慢性鐵負(fù)荷組大鼠肝臟

5、和心臟組織中CAT活性下降極為顯著(P＜0.01)，其它組織和血清中無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。與慢性鐵負(fù)荷組比較，各組動(dòng)物血清、肝、結(jié)腸和心臟組織中CAT活性顯著增加或極為顯著(P＜0.05，P＜0.01)，而腎臟組織中CAT活性顯著下降(P＜0.05)，脾臟組織中 CAT活性無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。鐵負(fù)荷+番茄紅素低劑量組大鼠脾臟組織中CAT活性顯著增加(P＜0.05)。與空白對(duì)照組比較，慢性鐵負(fù)荷組大鼠肝臟、心臟和結(jié)腸組織

6、中GST活性顯著下降(P＜0.05)，而脾臟、腎臟組織中GST活性增加極為顯著(P＜0.01)，番茄紅素干預(yù)中劑量組大鼠血清中GST活性顯著增加(P＜0.05)，其他各組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。與慢性鐵負(fù)荷組比較，番茄紅素干預(yù)組大鼠肝組織中GST活性顯著增加或極為顯著(P＜0.05，P＜0.01)，而脾和腎臟組織中GST活性顯著下降或極為顯著(P＜0.05，P＜0.01)。與空白對(duì)照組比較，慢性鐵負(fù)荷肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞Ki-

7、67增殖抗原表達(dá)顯著增加(P＜0.05);Caspase-3凋亡蛋白表達(dá)比較沒有顯著性差異(P＞0.05)。超微結(jié)構(gòu)上，模型組動(dòng)物肝細(xì)胞有大量鐵蛋白顆粒累積，線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜膨脹，胞質(zhì)中形成自噬前體;LC3-B微管相關(guān)蛋白有較強(qiáng)表達(dá)，空白對(duì)照和番茄紅素組動(dòng)物L(fēng)C3-B免疫陽(yáng)性染色沒有出現(xiàn)。
　　 結(jié)論:
　　 一定劑量的番茄紅素飼喂處理能有效改善慢性鐵負(fù)荷引起大鼠的氧化應(yīng)激損傷，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。同時(shí)，降低肝臟中鐵誘導(dǎo)