進(jìn)食富含ω-3多不飽和脂肪酸飲食對(duì)于反復(fù)性輕型顱腦損傷模型大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用研究.pdf

1、背景：
　　 顱腦創(chuàng)傷在一些發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)成為45歲以下人群致死或致殘的首要病因。在美國(guó)，每年約有170萬(wàn)人遭受不同程度的顱腦外傷。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)及交通的發(fā)展，中國(guó)顱腦外傷的發(fā)生率以及因顱腦外傷致死及致殘率也呈上升趨勢(shì)。越來(lái)越多的腦外傷患者需要接受長(zhǎng)期的治療及生活護(hù)理，給家庭及社會(huì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。依據(jù)格拉斯哥顱腦創(chuàng)傷評(píng)分(GCS)，可將顱腦創(chuàng)傷分為3類：輕型顱腦外傷(格拉斯哥評(píng)分13－15分)、中度顱腦損傷(格拉斯哥評(píng)分9－12

2、分)以及重度顱腦損傷(格拉斯哥評(píng)分≤8分)。輕型顱腦外傷或腦震蕩是臨床最為常見(jiàn)的顱腦創(chuàng)傷類型，約占臨床腦外傷病例的80％。相比于中度顱腦損傷約15％和重度顱腦損傷約40％致死率，約1％的患者死于輕度顱腦損傷。與其他類型顱腦創(chuàng)傷臨床表現(xiàn)不同，輕型顱腦外傷主要以頭疼、情緒變化、睡眠障礙、記憶力及認(rèn)知功能障礙為臨床表現(xiàn)，臨床統(tǒng)稱為顱腦創(chuàng)傷后綜合征。近年來(lái)，關(guān)于反復(fù)性輕型顱腦創(chuàng)傷已越來(lái)越引起研究人員的關(guān)注，特別是對(duì)于運(yùn)動(dòng)員和軍人等一些反復(fù)輕型腦

3、外傷發(fā)生的高比例人群。
　　 各種體外或體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示顱腦損傷初始機(jī)制均為外傷導(dǎo)致的級(jí)聯(lián)神經(jīng)炎性反應(yīng)以及代謝功能異常。在之前的實(shí)驗(yàn)性輕型顱腦外傷模型研究中，單次輕型顱腦創(chuàng)傷后實(shí)驗(yàn)對(duì)象體內(nèi)可檢測(cè)到明顯的生化改變，但這些變化均為可逆改變，腦組織功能也可得到完全恢復(fù)。目前越來(lái)越多的臨床及實(shí)驗(yàn)室證據(jù)表明，反復(fù)的輕型顱腦創(chuàng)傷可導(dǎo)致永久性的不可逆腦損傷。
　　 本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)建立單次或反復(fù)性輕型成年大鼠顱腦外傷模型，記錄不同組別顱腦

4、創(chuàng)傷后致死率及體重變化，并通過(guò)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)評(píng)估不同類型顱腦創(chuàng)傷對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象空間獲取及記憶存儲(chǔ)等認(rèn)知功能方面的影響。同時(shí)，利用不同組織染色方法比較各類型顱腦創(chuàng)傷后急性神經(jīng)元變性凋亡及長(zhǎng)期神經(jīng)細(xì)胞存活情況。同時(shí)我們根據(jù)前述實(shí)驗(yàn)結(jié)果給予實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)食一段時(shí)間(傷前4周至傷后2周)富含ω3－多不飽和脂肪酸的飼料，研究其對(duì)于反復(fù)性輕型顱腦創(chuàng)傷的神經(jīng)保護(hù)潛能。最終建立一種穩(wěn)定可靠的與戰(zhàn)創(chuàng)傷及運(yùn)動(dòng)性顱腦創(chuàng)傷相關(guān)的實(shí)驗(yàn)性腦損傷模型并驗(yàn)證ω3－脂肪酸酸在反復(fù)性

5、輕型顱腦創(chuàng)傷中的預(yù)防及治療作用。
　　 第一部分，建立反復(fù)輕型創(chuàng)傷性腦外傷模型并比較不同組別腦創(chuàng)傷后致死率及體重變化
　　 一、目的：建立反復(fù)輕型性創(chuàng)傷性腦外傷大鼠模型，并記錄不同組別死亡率及創(chuàng)傷后體重變化。
　　 二、材料和方法：1)成年雄性SD大鼠47只，體重范圍(300-350克)。根據(jù)顱腦創(chuàng)傷類型將實(shí)驗(yàn)對(duì)象隨機(jī)分為6組：1組(單側(cè)雙次，創(chuàng)傷時(shí)間間隔6小時(shí)，數(shù)量=8)；2組(單側(cè)雙次，創(chuàng)傷時(shí)間間隔24小時(shí)，

6、數(shù)量=8)；3組(雙側(cè)單次，創(chuàng)傷時(shí)間間隔1分鐘，數(shù)量=5)；4組(雙側(cè)雙次，創(chuàng)傷時(shí)間間隔6小時(shí)，數(shù)量=10)；5組(雙側(cè)雙次，創(chuàng)傷時(shí)間間隔24小時(shí)，數(shù)量＝8)；6組(對(duì)照組，單純行開(kāi)顱手術(shù)，無(wú)顱腦創(chuàng)傷，數(shù)量=8)。在動(dòng)物房?jī)?nèi)管理飼養(yǎng)一周直至手術(shù)。2)實(shí)驗(yàn)大鼠行氣管插管，呼吸機(jī)輔助呼吸，持續(xù)性吸入2％異氟烷維持麻醉，術(shù)中檢測(cè)大鼠呼吸、心率及體溫變化。根據(jù)不同創(chuàng)傷類型，實(shí)驗(yàn)對(duì)象行單側(cè)或雙側(cè)開(kāi)顱術(shù)。實(shí)驗(yàn)性顱腦創(chuàng)傷模型由側(cè)方液壓打擊模型誘導(dǎo)形成

7、，顱腦創(chuàng)傷打擊強(qiáng)度根據(jù)外接傳感示波器測(cè)量，本次實(shí)驗(yàn)打擊強(qiáng)度約為1.25倍大氣壓力，打擊次數(shù)及創(chuàng)傷時(shí)間間隔根據(jù)不同組別創(chuàng)傷類型予以區(qū)分。3)記錄并比較不同組別實(shí)驗(yàn)大鼠顱腦損傷打擊強(qiáng)度、腦損傷前后體溫及腦溫變化以及復(fù)蘇時(shí)間等指標(biāo)。同時(shí)監(jiān)測(cè)各組大鼠腦損傷后恢復(fù)情況及體重變化，比較不同組別顱腦外傷后實(shí)驗(yàn)大鼠死亡率。
　　 三、結(jié)果：1)不同組別實(shí)驗(yàn)大鼠顱腦創(chuàng)傷前體重?zé)o明顯差異，單次顱腦創(chuàng)傷打擊強(qiáng)度及顱腦創(chuàng)傷前后體溫及腦溫變化無(wú)顯著差異。

8、與單純行開(kāi)顱術(shù)無(wú)腦損傷組術(shù)后復(fù)蘇時(shí)間相比，所有類型顱腦損傷組術(shù)后復(fù)蘇時(shí)間均顯著延長(zhǎng)(p<0.05)。雙側(cè)輕型顱腦外傷組較單側(cè)輕型顱腦外傷組傷后復(fù)蘇時(shí)間較長(zhǎng)，但無(wú)明顯差異(p=0.578>0.05)，同時(shí)我們將本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與之前中度實(shí)驗(yàn)性顱腦創(chuàng)傷后復(fù)蘇時(shí)間相比，所有組別傷后復(fù)蘇時(shí)間明顯縮短(p<0.05)。2)相比于實(shí)驗(yàn)性中度顱腦外傷約20％死亡率，所有不同類型輕型顱腦損傷組中實(shí)驗(yàn)大鼠無(wú)一例死亡，腦外傷后死亡率為0。各組別實(shí)驗(yàn)對(duì)象顱腦外傷

9、后恢復(fù)良好，無(wú)明顯肢體運(yùn)動(dòng)及平衡功能障礙。3)腦外傷后不同組別體重變化：所有輕型顱腦外傷組傷后體重均呈下降趨勢(shì)，比較不同組別腦外傷后體重下降程度及恢復(fù)時(shí)間，統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示：1)雙側(cè)多次輕型顱腦損傷組較單側(cè)多次輕型顱腦損傷組，腦外傷后體重下降程度更嚴(yán)重，恢復(fù)至傷前體重水平所需時(shí)間明顯延長(zhǎng)(5天vs11天)；2)雙側(cè)多次輕型顱腦損傷組較雙側(cè)單次輕型顱腦損傷組，腦外傷后體重下降程度明顯，恢復(fù)至傷前體重水平所需時(shí)間明顯延長(zhǎng)(5天vs11天)；

10、3)單側(cè)多次輕型顱腦損傷組與雙側(cè)單次輕型顱腦損傷組相比，腦外傷后體重下降程度及恢復(fù)至傷前體重水平所需時(shí)間無(wú)顯著差別(5天vs5天)。
　　 四、結(jié)論：
　　 1.所有類型輕型顱腦損傷組別術(shù)后復(fù)蘇時(shí)間較無(wú)損傷組均顯著延長(zhǎng)(p<0.05)。雙側(cè)輕型顱腦外傷組較單側(cè)輕型顱腦外傷組傷后復(fù)蘇時(shí)間較長(zhǎng)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與中度顱腦創(chuàng)傷相比，各類型輕型顱腦外傷傷后復(fù)蘇時(shí)間顯著縮短(p<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此推測(cè)反復(fù)性輕型顱腦創(chuàng)傷其

11、腦組織損傷程度較單次輕型顱腦損傷較輕，腦組織功能恢復(fù)時(shí)間較短。
　　 2.相比于實(shí)驗(yàn)性中度顱腦外傷(致傷強(qiáng)度約為2.15倍大氣壓力)約20％的死亡率，所有不同類型輕型顱腦損傷組中實(shí)驗(yàn)大鼠無(wú)一例死亡，腦外傷后死亡率為0。各組別實(shí)驗(yàn)對(duì)象顱腦外傷后恢復(fù)良好，無(wú)明顯肢體運(yùn)動(dòng)及平衡功能障。由此推測(cè)打擊強(qiáng)度是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)對(duì)象腦外傷后死亡的主要因素，反復(fù)性輕型顱腦創(chuàng)傷強(qiáng)度不同于單次中度顱腦創(chuàng)傷。
　　 3.雙側(cè)多次輕型顱腦損傷組較其他類型

12、輕型腦損傷組可產(chǎn)生明顯的體重下降，其恢復(fù)至腦損傷前體重水平所需時(shí)間明顯延長(zhǎng)?？烧J(rèn)為多次反復(fù)性輕型顱腦損傷腦組織損傷程度較重，恢復(fù)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。
　　 第二部分，評(píng)估不同類型反復(fù)輕型創(chuàng)傷性腦損傷后對(duì)其認(rèn)知功能的影響
　　 一、目的：通過(guò)顱腦創(chuàng)傷后連續(xù)5天行為學(xué)測(cè)試，觀察并評(píng)估不同類型反復(fù)輕型創(chuàng)傷性腦損傷后對(duì)其認(rèn)知功能的影響。
　　 二、材料和方法：將不同類型輕型顱腦外傷組自腦創(chuàng)傷后12-16天連續(xù)5天行Morris

13、水迷宮行為學(xué)測(cè)試。整個(gè)行為學(xué)測(cè)試分為定位航行測(cè)試(placenavigation)及空間探索測(cè)試(spatialprobe)。1)定位航行測(cè)試：連續(xù)5天，每天將大鼠面向池壁分別從4個(gè)入水點(diǎn)放入水中若干次，記錄其尋找到隱藏在水面下平臺(tái)的時(shí)間及游動(dòng)速度和距離；2)空間探索測(cè)試：是在定位航行試驗(yàn)最后一天測(cè)試后去除平臺(tái)，然后選定一個(gè)入水點(diǎn)將大鼠放入水池中，記錄其在一定時(shí)間內(nèi)的游泳軌跡，考察大鼠對(duì)原平臺(tái)的記憶。
　　 三、結(jié)果：
　

14、　 1)所有不同類型輕型顱腦損傷組別中實(shí)驗(yàn)對(duì)象的游動(dòng)速度及視力測(cè)試均無(wú)明顯差異。
　　 2)與無(wú)損傷對(duì)照組相比較，單側(cè)雙次輕型顱腦損傷組中大鼠在測(cè)試1-2天存在明顯認(rèn)知功能障礙，雙側(cè)單次輕型顱腦損傷組中大鼠在測(cè)試1-3天存在明顯的認(rèn)知功能障礙，而雙側(cè)多次輕型顱腦損傷組中大鼠則在測(cè)試1-5天內(nèi)存在認(rèn)知功能障礙。3)與無(wú)損傷對(duì)照組最終測(cè)試結(jié)果相比，雙側(cè)多次輕型顱腦損傷組中實(shí)驗(yàn)大鼠存在明顯認(rèn)知功能障礙(第四組，p=0.003/第五組

15、，p<0.001)，而單側(cè)多次及雙側(cè)單次輕型顱腦損傷組中實(shí)驗(yàn)大鼠與無(wú)損傷組比較無(wú)顯著差別。
　　 3)空間探索測(cè)試顯示：多側(cè)反復(fù)輕型顱腦創(chuàng)傷組其各區(qū)域內(nèi)游動(dòng)軌跡相對(duì)較平均，而其他各組則表現(xiàn)出目標(biāo)區(qū)域相對(duì)集中性。
　　 四、結(jié)論
　　 1.單側(cè)多次及雙側(cè)單次輕型顱腦損傷組對(duì)腦創(chuàng)傷后認(rèn)知功能無(wú)顯著影響，可推測(cè)其損傷程度較輕，腦組織未造成永久性損傷，腦組織功能未受明顯影響。
　　 2.反復(fù)性輕型顱腦外傷可造成明

16、顯的認(rèn)知功能障礙，由此推測(cè)對(duì)于雙側(cè)重復(fù)性輕型腦創(chuàng)傷，6小時(shí)或24小時(shí)的時(shí)間間隔對(duì)于腦組織的功能恢復(fù)不夠充分，應(yīng)此連續(xù)的輕型腦創(chuàng)傷均可加重顱腦損傷程度。雖然與單次中度創(chuàng)傷性腦損傷相比，反復(fù)輕型顱腦創(chuàng)傷損傷程度更輕微，但重復(fù)的創(chuàng)傷累積可產(chǎn)生更為嚴(yán)重的長(zhǎng)期性認(rèn)知功能障礙。
　　 第三部分，比較不同類型反復(fù)性輕型顱腦損傷后腦組織觀察區(qū)域急性神經(jīng)元變性及長(zhǎng)期神經(jīng)細(xì)胞生存狀況
　　 一、目的：比較不同組別腦外傷后神經(jīng)細(xì)胞存活情況，研

17、究不同類型輕型顱腦損傷對(duì)腦組織的損傷程度。
　　 二、材料和方法：
　　 更據(jù)不同類型組織學(xué)染色要求，分別隨機(jī)抽取不同組別實(shí)驗(yàn)大鼠于傷后24小時(shí)內(nèi)或行為學(xué)測(cè)試最后一天(腦創(chuàng)傷后16天)通過(guò)4％多聚甲醛灌流(每只大鼠約150毫升)并固定腦組織，經(jīng)不同濃度蔗糖溶液浸泡保護(hù)后，將腦組織至于干冰冷凍，于切片機(jī)上將冰凍腦組織以每層45微米的厚度連續(xù)冠狀切片，選取10張腦組織貼片。室溫晾干組織切片后，分別行FluoroJade-B組

18、織熒光染色及甲酚紫(CV)染色評(píng)估不同組別神經(jīng)細(xì)胞受損情況，同時(shí)與先前實(shí)驗(yàn)性中度創(chuàng)傷性腦損傷大體腦組織形態(tài)及神經(jīng)細(xì)胞存活情況相比較，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 三、結(jié)果：
　　 1)腦外傷后16天腦組織大體形態(tài)學(xué)比較：與中度顱腦創(chuàng)傷后受傷區(qū)域腦組織常可見(jiàn)連續(xù)性疤痕或組織缺損不同，僅雙側(cè)多次或單側(cè)雙次輕型顱腦損傷組腦組織損傷局部可見(jiàn)輕微皮層下瘢痕或含鐵血黃素沉積，其余單次輕型腦創(chuàng)傷組腦組織打擊致傷區(qū)域未見(jiàn)明顯疤痕或腦組織皮層

19、缺損。光鏡下甲酚紫(CV)染色結(jié)果同時(shí)顯示，所有反復(fù)性輕型顱腦損傷組大鼠腦組織損傷相關(guān)區(qū)域未見(jiàn)缺血梗死或出血灶及外傷后瘢痕組織形成。
　　 2)所有不同類型輕型腦創(chuàng)傷組其創(chuàng)傷區(qū)域的頂葉皮層及丘腦均可見(jiàn)明顯的FJ-B陽(yáng)性熒光染色(p<0.05)，隨著打擊次數(shù)的增加，腦損傷后急性神經(jīng)元變性數(shù)量隨之增加，利用立體測(cè)量細(xì)胞計(jì)數(shù)軟件分析系統(tǒng)計(jì)算比較不同腦損傷組別外傷后急性期變性死亡的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量結(jié)果顯示單次反復(fù)性輕型顱腦損傷較單側(cè)單次輕型

20、顱腦損傷相比，表現(xiàn)出增加神經(jīng)細(xì)胞變性數(shù)量的趨勢(shì)。
　　 3)通過(guò)甲紫酚染色觀察比較不同類型反復(fù)性輕型顱腦損傷后同側(cè)腦組織海馬CA3區(qū)長(zhǎng)期神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)量結(jié)果提示所有不同類性顱腦損傷后均可導(dǎo)致不同程度的長(zhǎng)期存活神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量下降，且各不同組別腦外傷后神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)量有顯著差異(p<0.01)。單次輕型顱腦損傷后神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)量與無(wú)損傷組無(wú)顯著差別(p>0.05)。反復(fù)性即同側(cè)2次輕型顱腦損傷，無(wú)論創(chuàng)傷時(shí)間間隔6或24小時(shí)，均可產(chǎn)生最

21、顯著的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量下降(p<0.01)。
　　 四、結(jié)論
　　 1)傷后24小時(shí)FJ－B熒光染色結(jié)果提示各種類型輕型顱腦損傷均可造成受傷區(qū)域海馬及皮層不同程度急性神經(jīng)細(xì)胞變性死亡，反復(fù)性輕型顱腦由于打擊次數(shù)增加，可導(dǎo)致急性腦損傷程度加重及表現(xiàn)出增加變性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量的趨勢(shì)。
　　 2)傷后腦組織大體形態(tài)學(xué)表明，腦組織機(jī)械損傷程度主要與瞬間顱腦打擊強(qiáng)度有關(guān)，輕型顱腦損傷由于腦組織機(jī)械性打擊程度較輕，相比于中度顱腦損傷

22、，腦組織大體形態(tài)病理學(xué)無(wú)特殊改變。
　　 3)甲酚紫(CV)染色結(jié)果顯示多次反復(fù)輕型顱腦損傷可惡化繼發(fā)性腦損傷程度，表現(xiàn)為顯著增加腦組織損傷相關(guān)區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞丟失數(shù)量，造成腦組織不可逆的損傷。
　　 第四部分，ω3－魚(yú)脂酸對(duì)反復(fù)性輕型創(chuàng)傷性腦損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究
　　 一、目的：確立ω3－魚(yú)脂酸對(duì)反復(fù)性輕型顱腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用并探討其對(duì)腦外傷后大鼠認(rèn)知功能的影響。
　　 二、材料和方法：
　　

23、將32只實(shí)驗(yàn)大鼠(體重約150克，出生時(shí)長(zhǎng)：6周)隨機(jī)根據(jù)飼養(yǎng)食物不同分為兩組，每組各16只，其中一種食物中富含ω3－魚(yú)脂酸，而另一組食物以普通實(shí)驗(yàn)飼料為對(duì)照。所有大鼠與腦損傷前4周開(kāi)始進(jìn)食不同食物，并持續(xù)進(jìn)食至傷后2周，直至行為學(xué)實(shí)驗(yàn)完成。實(shí)驗(yàn)期間記錄每天不同組別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重變化。顱腦創(chuàng)傷后10－14天連續(xù)5天行Morris水迷宮行為學(xué)測(cè)試，分別記錄每只實(shí)驗(yàn)大鼠游向平臺(tái)時(shí)間及游行速度。評(píng)估空間認(rèn)知及記憶功能。行為學(xué)測(cè)試最后一天(腦創(chuàng)

24、傷后16天)通過(guò)4％多聚甲醛灌流(每只大鼠約150毫升)并固定腦組織，經(jīng)不同濃度蔗糖溶液浸泡保護(hù)后，將腦組織至于干冰冷凍，與切片機(jī)上冠狀切面將冰凍腦組織以每層45微米的厚度切片、貼片。室溫晾干組織切片后，行甲酚紫(CV)染色評(píng)估不同組別神經(jīng)細(xì)胞受損情況，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 三、結(jié)果：
　　 1)兩組中顱腦外傷打擊強(qiáng)度、傷后意識(shí)及反射恢復(fù)時(shí)間、損傷前后體溫及腦溫變化無(wú)顯著性差別。顱腦外傷前進(jìn)食不同食物4周時(shí)間，各組別

25、大鼠體重增長(zhǎng)比率無(wú)差別，但傷后體重記錄顯示，進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸飼料組大鼠可明顯減輕體重減少程度(311±25gvs321±22g)，恢復(fù)至腦外傷前基礎(chǔ)體重時(shí)間較對(duì)照飲食治療組縮短。
　　 2)兩組不同飲食組于腦損傷后10－14天行水迷宮行為學(xué)評(píng)估，其中各組中實(shí)驗(yàn)對(duì)象的游動(dòng)速度及視力測(cè)試均無(wú)明顯差異。進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸飼料的實(shí)驗(yàn)大鼠腦外傷后較進(jìn)食普通飼料的實(shí)驗(yàn)大鼠在認(rèn)知功能方面有明顯改善。比較行為學(xué)測(cè)試最后一天各組別游向平臺(tái)時(shí)

26、間，ω3－魚(yú)脂酸飲食組平均用時(shí)顯著縮短(p=0.030,p<0.05)。空間探索測(cè)試結(jié)果顯示，二組實(shí)驗(yàn)大鼠均表現(xiàn)出目標(biāo)區(qū)域相對(duì)集中性，進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸組大鼠與目標(biāo)區(qū)域游動(dòng)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)(22.8±3.6秒vs19.7±2.9秒)。
　　 3)組織學(xué)檢查結(jié)果：各組別大鼠與行為學(xué)測(cè)試最后一天(腦外傷后16天)處死，提取腦組織標(biāo)本行甲酚紫(CV)染色，用以評(píng)估不同組別神經(jīng)細(xì)胞長(zhǎng)期生存狀況。腦組織大體形態(tài)學(xué)比較(4×)：進(jìn)食普通實(shí)驗(yàn)飼

27、料組大鼠較進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸組大鼠相比，其腦組織海馬顆粒層厚度及細(xì)胞密度減少。光鏡下甲酚紫(CV)染色結(jié)果同時(shí)顯示(100×)，不同飲食組雙側(cè)海馬CA2/3區(qū)域平均神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量比較結(jié)果上無(wú)顯著性差異(左側(cè)：p=0.149p>0.05；右側(cè)：p=0.253p>0.05)，然而，進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸組顯示出可減少神經(jīng)細(xì)胞死亡的趨勢(shì)。
　　 四、結(jié)論
　　 1)各組大鼠傷后無(wú)死亡率。腦外傷前至傷后一段時(shí)間進(jìn)食ω3－脂肪酸，可

28、滿足機(jī)體顱腦外傷后的高代謝及能量需求狀態(tài)，明顯減輕反復(fù)性輕型顱腦創(chuàng)傷后體重下降，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，改善傷后恢復(fù)。
　　 2)反復(fù)性輕型顱腦損傷組可產(chǎn)生明顯的認(rèn)知功能障礙，進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸飼料可明顯改善腦外傷后空間認(rèn)知及記憶功能，并顯示出更明顯的目標(biāo)區(qū)域的偏好性。
　　 3)甲酚紫(CV)染色結(jié)果顯示雖然二組不同飲食組在平均神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目皮較無(wú)顯著性差異，但與進(jìn)食普通實(shí)驗(yàn)飼料組大鼠相比，進(jìn)食富含ω3－魚(yú)脂酸飼料的大鼠顯示