三葉因子1與醛酮還原酶A1C1相互作用的驗證.pdf

1、福建醫(yī)科大學碩士學位論文三葉因子1與醛酮還原酶A1C1相互作用的驗證姓名：蔡稼燕申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學（消化病學）指導教師：任建林20090301’’’r i f i c a t i o no n t h ei n t e r a c t i o nb e t w e e n t r e f o i lf a c t o r1 V e r me t e r a c t i o na n d a l d o ．．k e t or

2、e d u c t a s e A I C lC a n d i d a t ef o r P o s t g r a d u a t e ：C a i J i a y a nT u t o r ：P e n J i a n l i nA b s t r a c tO B J E C T I V E ：T o a n a l y z e t h ei n t e r a c t i o no f T F F 1w i t h A K R

3、 l C 1a n d o b s e r v et h ee x p r e s s i o n a n d c e l l u l a rl o c a l i z a t i o no f T F F l a n d A K R I C I ．M E T H O D S ：碭e e D N A f r a g m e n t s e n c o d i n g T F F Ia n d A K R I C 1w a s a m p

4、 l i f i e db yp o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n ( P C R ) m e t h o d ，a n ds u b s e q u e n t l yw e r ec l o n e di n t op C M V - A Da n d p C M V - B D v e c t o r a n d s e q u e n c e d ，r e s p e c t i

5、 v e l y ．P l a s m i d sp C M V - N F k B - ·T F F 1 a n dp C M V - G A L 4 ·- A K R I C 1w e r ec o n s t r u c t e da n dt h e nt h es t u d i e s o fb i n d i n gi n v i v o w e r ec a r r i e d o u t b yC

6、O —i m m u n o p r e c i p i t a t i o n a f t e re 1 ) 一t r a n s f e c t i o no f t h ec o n s t r u c t si n t o2 9 3 F T c e l l s ．T h ee x p r e s s i o na n ds u b c e U u l a rl o c a l i z a t i o no f t h ef u

7、s i o np r o t e i ni nt h et r a n s f e c t e d2 9 3 一F Tc e l l sw e r ea n a l y z e db yW e s t e r n b l o t t i n ga n d f l u o r e s c e n c e c o n f o c a l m i c r o s c o p y , r e s p e c t i v e l y ．R E S

8、 U L T S ：W e s t e r n b l o t t i n gc o n f i r m e dt h ee x p r e s s i o no f f u s i o np r o t e i ni nt h et r a n s f e c t e d2 9 3 F T c e l l s ．T h ei n t e r a c t i o n sb e t w e e nT F F 1 a n d i n t e

9、 r a c t i v ep r o t e i n sA K R l C 1 w a sc o n f i r m e db yC O —i m m u n o p r e c i p i t a t i o n t e c h n i q u e ．F l u o r e s c e n c ee o n f o e a l m i c r o s c o p y s h o w e d t h a t t h e f u s i

10、 o n p r o t e i n s h a d p a r t i a l c e l l u l a rC O ．1 0 c a l i z a t i o ni n 2 9 3 F T c e l l ．C o N C L U S I o N ：1 1 1 i s r e s e a r c hi n d i c a t e st h a tA K R I C I p r o t e i nm a y b ea n e w l

11、 yi d e n t i f i e d p r o t e i n w h i c hi n t e r a c t s 、柝t l lT F F 1 ．T F F 1 h a sc o m p r e h e n s i v er o l e sw h i c hr e m a i nt ob ee l u c i d a t e d ．N e v e r t h e l e s s ，o u rw o r ko f f e r

12、sa no p p o r t u n i t yt op r o b ei n t ot h er o l eo f T F F 1i nt h ep a t h o g e n e s i so fg a s t r o i n t e s t i n a ld i s e a s e sa n dC a n C e r ．K E Y W O R D S ：T F F l ；A K R l C 1 ；f l u o r e s c