脂聯(lián)素對(duì)高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的影響.pdf

1、研究背景：糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病(DM)最為常見(jiàn)和最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，已成為大多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家致盲的首要原因。視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞位于視網(wǎng)膜感覺(jué)層和脈絡(luò)膜之間，構(gòu)成視網(wǎng)膜外屏障，病理研究表明RPE細(xì)胞參與了DR的晚期病理變化，引起了眼內(nèi)的病理性新生血管形成。脂聯(lián)素(Adiponectin)是最近發(fā)現(xiàn)的一種由脂肪細(xì)胞分泌的特異蛋白質(zhì)，臨床和基礎(chǔ)研究均表明，脂聯(lián)素與DR發(fā)生、發(fā)展

2、有密切關(guān)系。本研究通過(guò)脂聯(lián)素對(duì)RPE細(xì)胞分泌的VEGF及PEDF的影響，旨在探討其在DR發(fā)生發(fā)展中的作用，并可能為治療DR提供一條新的途徑。 目的：觀察脂聯(lián)素對(duì)高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)細(xì)胞活性及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)分泌的影響，以闡明脂聯(lián)素對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)可能具有的保護(hù)作用。 方法：體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，隨機(jī)分為四組：①正常對(duì)照組(5.5 mmol/L葡

3、萄糖)，②高糖組(33mmol/L葡萄糖)，③甘露醇組：(5.5mmol/L葡萄糖＋27.5 mmol/L甘露醇)④高糖+脂聯(lián)素組(33mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml脂聯(lián)素)，用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)方法檢測(cè)不同情況下48h后對(duì)hRPE細(xì)胞活性的影響。再將hRPE細(xì)胞分為三組①正常對(duì)照組(5.5 mmol/L葡萄糖)，②高糖組(33 mmol/L葡萄糖)，③高糖+不同濃度的脂聯(lián)素組(33mmol/L葡萄糖+2.5，5，10，20

4、μg/ml脂聯(lián)素)，作用48小時(shí)后運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定hRPE細(xì)胞上清液中VEGF及PEDF的含量。 結(jié)果：甘露醇組細(xì)胞活力與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。高糖組抑制hRPE細(xì)胞活性，高糖組細(xì)胞活力明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)；加入脂聯(lián)素干預(yù)后，細(xì)胞活力比高糖組和對(duì)照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與正常對(duì)照組相比，高糖組VEGF水平明顯升高，PEDF水平明顯下降，加入2.5μg/

5、ml脂聯(lián)素對(duì)于VEGF及PEDF水平影響不大，脂聯(lián)素濃度達(dá)到5～20μg/ml時(shí)和高糖組相比，VEGF水平顯著降低、PEDF水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。 結(jié)論：高糖明顯降低hRPE細(xì)胞活力，損傷hRPE細(xì)胞的功能，高糖可以導(dǎo)致hRPE細(xì)胞分泌VEGF增多，分泌PEDF減少，參與DR的發(fā)生發(fā)展；脂聯(lián)素可以促進(jìn)hRPE增殖，減輕細(xì)胞損傷；生理濃度(5～20μg/ml)脂聯(lián)素可糾正高糖誘導(dǎo)的VEGF和PEDF水平的