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文檔簡介
1、據(jù)《本草綱目》記載,石榴皮主治瀉痢,下血,脫肛,崩中帶下。石榴皮能收斂澀腸,水煎劑治療久瀉、久痢滑脫不禁有效,已載入中國藥典。前人的動物實(shí)驗(yàn)證實(shí),石榴皮提取物對潰瘍性結(jié)腸炎、胃潰瘍的發(fā)生都有一定的抑制作用。隨著社會競爭、生存壓力的增大,因應(yīng)激導(dǎo)致的胃腸功能紊亂性疾病----腸易激綜合征(IBS)的患病率達(dá)到8-16%。IBS的共同特征是胃腸運(yùn)動功能改變和內(nèi)臟器官的敏感性異常。那么,石榴皮水提物對應(yīng)激致胃腸運(yùn)動異常有無影響?這種影響是通過
2、何種途徑發(fā)揮作用的?這是本文所要研究的問題。
大鼠束縛-浸水應(yīng)激(RWIS),作為一種心理和軀體的復(fù)合應(yīng)激模型,已被廣泛應(yīng)用于研究應(yīng)激性胃粘膜損傷的發(fā)生機(jī)制及其臨床治療藥物的篩選。本文通過探索石榴皮水提物對正常大鼠胃腸運(yùn)動有無影響及作用途徑、石榴皮水提物對束縛-浸水應(yīng)激大鼠胃腸壁內(nèi)肌間神經(jīng)叢活動影響的初步研究,為石榴皮藥用價值的開發(fā)和利用提供動物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
本文的實(shí)驗(yàn)研究分為以下三個部分:
一、石榴皮水提物
3、對正常大鼠離體胃腸平滑肌運(yùn)動的影響利用張力換能器和BL-420生物機(jī)能系統(tǒng)記錄胃腸運(yùn)動曲線,分別用0.1、0.5、1、5mg/ml4種濃度的石榴皮水提物、不同藥物及1mg/ml石榴皮水提物和不同藥物混合液作用于離體胃、小腸和結(jié)腸段,分析給藥前5min,后5、10min離體胃、小腸和結(jié)腸段收縮頻率和幅度。與給藥前比較,1和5mg/ml2種濃度的石榴皮水提物對十二指腸段的收縮頻率均有明顯的抑制作用(P<0.05);0.1、0.5 mg/ml
4、雖然也使頻率降低,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);除5mg/ml組在給藥后第10min的收縮幅度小于給藥前(P<0.05)外,其他各組對收縮幅度的影響均不顯著(P>0.05)。各種濃度的石榴皮水提物對胃、結(jié)腸的作用與十二指腸類似。1mg/ml的鞣酸、沒食子酸分別作用于胃、小腸和結(jié)腸段,均可引收縮頻率和幅度下降(P<0.05)。5μg/ml的組織胺、氯雷他定對離體胃運(yùn)動曲線的頻率、幅度影響,與給藥前比較,差異不顯著(P>0.05);這兩種
5、藥物分別與1mg/ml石榴皮水提物混合后,作用于離體胃時,胃的收縮頻率、幅度均顯著性的下降(P≤0.01);對大小腸也存在類似的作用。結(jié)果提示:石榴皮水提物的1、5mg/ml2種濃度為引起胃腸平滑肌收縮的有效濃度;起效成分可能是石榴皮水提物中的鞣酸和沒食子酸;其作用可能通過調(diào)節(jié)組織胺活動途徑實(shí)現(xiàn)的。
二、石榴皮水提物對大鼠在體胃腸運(yùn)動功能的影響動物隨機(jī)分為雙蒸水組、石榴皮水提物組、嗎丁啉組和阿托品組,每組6只。灌胃給藥,每天一
6、次,連續(xù)5天。末次灌藥1h后,再灌胃2ml營養(yǎng)性半固體糊,40min后頸椎脫臼處死大鼠。以胃內(nèi)殘留率、小腸推進(jìn)率和排便的粒數(shù)為指標(biāo),檢測不同藥物對大鼠胃腸運(yùn)動功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與蒸餾水組、阿托品組相比,石榴皮組胃內(nèi)殘留率顯著性降低(P<0.05);小腸推進(jìn)率顯著性升高(P<0.05);與嗎丁啉組相比,胃內(nèi)殘留率無顯著性差異(P>0.05);石榴皮組大鼠排便量分別與蒸餾水組、嗎丁啉組組比較,差異均顯著(P<0.05);石榴皮與阿托品組
7、比較,差異不顯著(P>0.05)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:石榴皮水提物能夠促進(jìn)正常大鼠胃排空和小腸對食糜的推進(jìn)作用,該作用與嗎丁啉類似。但對大鼠排便量有抑制作用,且該抑制作用與阿托品的類似。
三、石榴皮對束縛-浸水應(yīng)激大鼠胃腸壁肌間神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)元活動的影響利用Fos蛋白免疫標(biāo)記法、Fos蛋白與膽堿乙?;该庖唠p標(biāo)方法,研究石榴皮水提物對束縛-浸水應(yīng)激大鼠胃腸壁內(nèi)肌間神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)元活動的影響。動物隨機(jī)分為雙蒸水+未應(yīng)激組、雙蒸水+應(yīng)激組
8、、石榴皮水提物+應(yīng)激組,每組3只。灌胃給藥,每天一次,連續(xù)5天。末次灌藥1h后,行束縛-浸水應(yīng)激1h,烏拉坦注射過量處死大鼠,取胃腸,進(jìn)行免疫組化處理。末次灌藥1h后,行束縛-浸水應(yīng)激3h,同上法處死大鼠,取胃測定胃黏膜損傷指數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):與對照組相比,石榴皮水提物應(yīng)激組肌間神經(jīng)叢的Fos蛋白表達(dá)在胃、小腸和結(jié)腸中均降低,但胃壁中不顯著(P>0.05),小腸和結(jié)腸中降低明顯(P<0.05)。束縛-浸水應(yīng)激中這些 Fos蛋白表達(dá)陽性的神經(jīng)
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