基因診斷有汗性外胚葉發(fā)育不良一家系.pdf

1、外胚葉發(fā)育不良（Ectodermal dysplasias，EDs）是一種以指（趾）甲、毛發(fā)、牙齒、汗腺等外胚層起源的組織發(fā)育缺陷為主要特征的遺傳性疾病。迄今為止，有200多種外胚葉發(fā)育不良疾病被報(bào)道，約有30多種通過(guò)在分子水平鑒定其致病基因而被確診，而只涉及指（趾）甲和毛發(fā)損害的外胚葉發(fā)育不良是非常罕見(jiàn)的。外胚葉發(fā)育不良可以僅累及外胚層組織單獨(dú)發(fā)生，也可以成為某些遺傳性疾病的一個(gè)重要臨床特征。由于其臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，故當(dāng)某種綜合征表現(xiàn)

2、不全或與其他綜合征存在癥狀重疊時(shí)，不同類型的外胚葉發(fā)育不良疾病一時(shí)很難準(zhǔn)確診斷。 目的:對(duì)一個(gè)僅有甲和毛發(fā)損害的外胚葉發(fā)育不良家系進(jìn)行基因突變研究，篩查導(dǎo)致相關(guān)臨床表型的候選基因，以期發(fā)現(xiàn)該家系的致病基因，明確臨床診斷。 方法:收集該家系7例患者及15例正常家系成員外周血，常規(guī)酚-氯仿法提取基因組DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增候選基因K16、K17、K6a、KBb和GJB6基因的整個(gè)編碼區(qū)序列，然后用SAP、Ex

3、onⅠ純化PER產(chǎn)物，采用3700 DNA自動(dòng)測(cè)序儀直接測(cè)序，明確具體的突變位置和方式。提取先證者病變皮膚組織RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）在mRNA水平驗(yàn)證該家系的致病基因。 結(jié)果: PER產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果顯示，4個(gè)角蛋白基因（K16、K17、K6a和K6b）未檢測(cè)到任何致病突變。該家系所有患者GJB6基因均存在一個(gè)雜合錯(cuò)義突變31G→A，導(dǎo)致N-末端區(qū)域第11位甘氨酸被精氨酸替代（即G11R），而家系中的15例正