去甲基化酶FBXL10通過(guò)抑制FOXC1促進(jìn)乳腺癌增殖.pdf

1、組蛋白去甲基化酶FBXL10(F-box and leucine.rich repeat protein10)是最大的組蛋白去甲基化酶亞家族JmjC蛋白家族的成員之一,編碼它的基因定位于12q24.31,具有特異性的H3K4me3和H3K36me2／1去甲基化酶活性。FBXL10又名JHDM1B(Jmjcdomian—containing histone demethylase1B)、KDM2B(lysine(K)-specific d

2、emethylase2B)、Ndy-1(Not deadyet-1),FBXL10蛋白具有JmjC去甲基化酶活性結(jié)構(gòu)域,CXXC DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域,PHD植物同源結(jié)構(gòu)域,proline-rich脯氨酸富集結(jié)構(gòu)域,F-box結(jié)構(gòu)域和leucine-rich repeat結(jié)構(gòu)域。關(guān)于FBXL10在癌癥方面的功能研究頗有爭(zhēng)議,根據(jù)細(xì)胞背景的不同,可分為抑癌和致癌兩方面,已有報(bào)道FBXL10在人類(lèi)淋巴瘤和乳腺癌中有高表達(dá)。
　　 轉(zhuǎn)錄因

3、子FOxC1是Forkhead box(Fox)家族中的亞家族FOxC的成員之一,FOXC1蛋白含有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)、DNA結(jié)合區(qū)和一些其他的結(jié)構(gòu)。我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)FBXL10與FOXC1在兩種轉(zhuǎn)移能力不同的乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和MDA—MB-231中的表達(dá)水平呈現(xiàn)明顯負(fù)相關(guān),進(jìn)一步分別過(guò)表達(dá)和干涉實(shí)驗(yàn)證實(shí)FBXL10能夠調(diào)控FOXC1基因的轉(zhuǎn)錄。本實(shí)驗(yàn)室此前的研究表明,FOXC1在乳腺癌細(xì)胞系中的外源表達(dá)能夠抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖,PcG家族

4、蛋白EZH2能夠通過(guò)影響FOXC1基因啟動(dòng)子處組蛋白乙酰化和H3K27的三甲基化來(lái)抑制FOXC1,而組蛋白去甲基化酶FBXL10在乳腺癌中的功能以及此功能的實(shí)現(xiàn)是否與FOXC1有關(guān)仍未見(jiàn)報(bào)道。
　　 本論文旨在研究組蛋白去甲基化酶FBXL10對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響及其功能的實(shí)現(xiàn)是否通過(guò)FOXC1起作用。MTT結(jié)果顯示,外源過(guò)表達(dá)去甲基化酶FBXL10能明顯促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞MCF7的增殖。熒光素酶報(bào)告基因、反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR