TRAF6在急性顱腦損傷中作用的研究.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)急性腦損傷組織中TRAF6的表達(dá)水平,及觀察TRAF6對(duì)NFκB報(bào)告基因活化和對(duì)星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞趨化因子CCL18產(chǎn)生的影響,為尋找新的急性腦損傷后炎癥反應(yīng)的重要調(diào)控靶點(diǎn)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及理論依據(jù)。
　　方法:選取2010年7月~2010年9月間濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)外科重型顱腦損傷(GCS<9’)手術(shù)病人30例,分別取無(wú)功能周圍正常腦組織和損傷的腦組織,作為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。RT-PCR法檢測(cè)兩組標(biāo)本中TRAF6的表達(dá);將

2、擴(kuò)增的TRAF6基因編碼區(qū)全長(zhǎng)片段克隆到pcDNA3.1(+),并轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞,Western blot檢測(cè)TRAF6的蛋白表達(dá);雙螢光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)TRAF6對(duì)NFκB報(bào)告基因活化的影響;ELISA檢測(cè)TRAF6對(duì)星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞趨化因子CCL18產(chǎn)生的影響。
　　結(jié)果:與對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組TRAF6的表達(dá)明顯升高,且差異具有顯著性(P<0.05);構(gòu)建的TRAF6真核表達(dá)載體可在HEK293T細(xì)胞中表達(dá);與對(duì)照