聯(lián)合應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與pLXSN-bcl-2基因治療大鼠缺血性腦損傷療效的研究.pdf

1、缺血性腦血管病的發(fā)病率和病死率逐年增加，并呈年輕化趨勢，已經(jīng)越來越嚴(yán)重的威脅到人類健康和生活，因此，缺血性腦血管病有效的治療方法一直是人們研究的重要課題。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是目前缺血性腦血管病治療研究的熱點(diǎn)， MSC的治療效果已經(jīng)從多方面得到證實(shí)。但是，MSC移植入腦后所面臨的一個(gè)重要問題就是細(xì)胞凋亡，如何減少M(fèi)SC的自身凋亡，更大限度的發(fā)揮它的作用需要進(jìn)一步探討。本研究將MSC與已經(jīng)明確具有抗凋亡作用的bcl-2基因

2、聯(lián)合應(yīng)用大鼠腦缺血模型，通過觀察大鼠的神經(jīng)功能評(píng)分、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)表達(dá)情況、腦內(nèi)細(xì)胞凋亡情況等指標(biāo)，探討這兩種因素的聯(lián)合應(yīng)用是否對(duì)缺血性腦血管病的有更好的治療效果及其作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)材料與方法： 將40只Wistar大鼠制作為大腦中動(dòng)脈缺血(MCAo)模型，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、單純MSC組、單純bcl-2基因組和實(shí)驗(yàn)組(MSC+bcl-2組)，分別于造模后3小時(shí)和24小時(shí)經(jīng)頸動(dòng)脈和尾靜脈注入質(zhì)粒pLXSN

3、攜帶的bcl-2基因和BrdU標(biāo)記的MSC，觀察大鼠的神經(jīng)功能評(píng)分；每組大鼠又分為3天、14天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只)，斷頭取腦，免疫組化法觀測腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)情況、Bcl-2蛋白表達(dá)水平、BrdU標(biāo)記的MSC在腦內(nèi)的分布及數(shù)量，TUNEL法檢測腦內(nèi)細(xì)胞凋亡情況。 每個(gè)標(biāo)本取兩張切片，在光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)于梗死側(cè)梗死灶邊緣、海馬及紋狀體區(qū)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野(HPF，×400)，顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像。全部資料采用SP