丹紅注射液對多索茶堿片在大鼠體內(nèi)藥動學影響的研究.pdf

1、目的:
　　建立大鼠體內(nèi)多索茶堿及其代謝產(chǎn)物茶堿的反相高效液相色譜的測定方法。研究丹紅注射液對多索茶堿片在大鼠體內(nèi)的藥動學的影響。
　　方法:
　　1.大鼠血漿中多索茶堿及其代謝產(chǎn)物茶堿的反相高效液相色譜測定方法:JASCO LC-1500型高效液相色譜儀，以Hypersil-ODS2(250mm×4.6mm，5μm)為分析柱，ODS(10mm×4.6mmm，5μm)為保護柱，流動相為甲醇-三乙胺磷酸溶液(23∶77)

2、，流速1.0mL·min-1，檢測波長273 nm，內(nèi)標為咖啡因（50μg·mL-1）。血漿樣品以乙酸乙酯-異丙醇(95∶5)提取，于40℃氮氣流揮干，殘留物加流動相100μl溶解，取20μl進樣分析。
　　2.藥代動力學實驗:8只SD大鼠采用自身對照設(shè)計，每次灌胃10.0mg·mL-1多索茶堿水溶液(80.0mg·kg-1，qd，ig)前禁食12h，自由飲水。并在灌胃前和灌胃后0.083、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0

3、、3.0、5.0、8.0h尾靜脈取血0.3mL。第1天，大鼠給予10.0mg·mL-1多索茶堿水溶液（80.0mg·kg-1，qd，ig），第2天開始給予丹紅注射液(2mL·kg-1，ip，qd)，連續(xù)用藥5天，限制咖啡因飲食、自由飲水。第7天給予丹紅注射液后給予多索茶堿水溶液(80.0mg·kg-1，ig)。尾靜脈采集的血收集于肝素化的離心管中，離心(14000 r·min-1×10min)，分離血漿，于-40℃冷凍保存。用反相高效液

4、相色譜法測定血漿中多索茶堿和茶堿的濃度。用DAS軟件分析藥代動力學參數(shù)，繪制藥物濃度-時間曲線，用配對t檢驗分析聯(lián)用丹紅注射液前后DL、TL的藥動學參數(shù)t1/2、AUC(0-8)、MRT(0-8)、Vz/F、CL/F、Cmax的變化，Tmax采用Wilcoxon非參數(shù)秩和檢驗進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:
　　1.本實驗的色譜條件下多索茶堿和茶堿、內(nèi)標咖啡因能完全分離，峰形對稱性好，沒有內(nèi)源性雜質(zhì)的干擾。茶堿的保留時間為4.8m

5、in，咖啡因的保留時間為6.7min、多索茶堿的保留時間為9.6min。多索茶堿在1.0～60.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9990)，定量限為1.0μg·mL-1;茶堿在0.5～30.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9992)，定量限為0.5μg· mL-1;多索茶堿高、中、低(40.0、20.0、5.0μg·mL-1)3個濃度的日內(nèi)精密度的RSD分別為1.46％、0.96％、0.81％，平均相對回

6、收率為98.96％，平均絕對回收率為88.38％。茶堿高、中、低(20.0、10.0、1.0μg·mL-1)3個濃度的日內(nèi)精密度的RSD分別為1.76％、1.49％、1.33％，平均相對回收率為101.85％，平均絕對回收率為73.02％。血漿樣品在室溫放置和冰凍的條件下以及標準品儲備液(DL1mg·mL-1和TL1mg·mL-1)4℃貯存30d內(nèi)，穩(wěn)定性良好。
　　2.合并給藥前后多索茶堿的藥動學參數(shù)分別為:半衰期(t1/2):

7、(1.76±0.20)和(2.16±0.23)h;曲線下面積(AUC(0-8)):(107.55±14.69)和(144.08±16.92) mg·h·L-1;平均駐留時間(MRT(0-8)):(2.25±0.13)和(2.91±0.27)h;表觀分布容積(Vz/F):(1.51±0.14)和(1.45±0.17) L· kg-1;清除率(CL/F):(0.51±0.11)和(0.39±0.07)L·h-1·kg-1;達峰時間(Tmax

8、):(0.49±0.01)和(0.53±0.04)h;達峰濃度(Cmax):(40.53±16.30)和(46.94±8.11) mg·L-1。合并用藥前后茶堿的曲線下面積（AUC(0-8))分別為(24.30±4.88)和(29.98±5.96) mg·h·L-1。
　　3.合并用藥前后大鼠體內(nèi)多索茶堿藥動學參數(shù)Vz/F、Tmax、Cmax無顯著性差異(P＞0.05)，AUC(0-8)、t1/2、MRT(0-8)、CL/F有顯著

9、性差異(P＜0.05)，AUC(0-8)合用后提高了33.97％，t1/2合用組提高了23.42％，MRT(0-8)合用組提高了29.33％，CL/F合用組減少了22.51％。茶堿的AUC(0-8)有顯著性差異(P＜0.05)，合并給藥后提高了23.37％。
　　結(jié)論:
　　1.本研究建立的同時測定多索茶堿和茶堿的RP-HPLC法，操作快速簡便，系統(tǒng)適應(yīng)性強，結(jié)果準確可靠，可用于多索茶堿和茶堿藥代動力學的研究。
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