胺碘酮對兔心肌缺血-再灌注無復流的保護作用及機制的探討.pdf

1、目的:
　　 通過建立兔心肌缺血/再灌注無復流模型，觀察胺碘酮對心肌缺血/再灌注無復流的保護作用及相關機制:
　　 ①通過檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及無復流范圍，從氧自由基角度來探討胺碘酮對無復流的保護作用;
　　 ②通過檢測心肌細胞凋亡率、凋亡相關基因Bcl-2、Bax蛋白的表達及無復流范圍，從細胞凋亡角度來探討胺碘酮對無復流的保護作用。
　　 方法:
　　 實驗模型

2、的制備及檢測流程:清潔級健康新西蘭大白兔60只，雌雄不限，兔齡11-12周，體重2.5±0.3kg，由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供。實驗兔子隨機分為三組:
　　 ①假手術組(Sham)，僅開胸不結扎冠脈血管，保留210min;
　　 ②缺血/再灌注組(I/R)，結扎左回旋支90min后再灌注120min，建立兔心肌無復流模型（參考Kloner的無復流模型），再灌注即刻給予等量的5％的葡萄糖注射液;
　　 ③胺碘酮

3、組(AM)，結扎左回旋支90min后再灌注120min，再灌注即刻給予胺碘酮(3mg/kg);每組20只。
　　 于再灌注120min后取血測SOD活性及MDA含量，并采用免疫組化法測定Bcl-2、Bax的表達，應用流式細胞儀檢測心肌細胞凋亡率，術后取心臟進行缺血、無復流范圍的評估。統(tǒng)計方法:全部統(tǒng)計學數(shù)據(jù)分析均用SPSS13.5處理，計量資料以(X)±s表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用q檢

4、驗(Newman-Keuls法)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 ①在缺血范圍差異無統(tǒng)計學意義的條件下，AM組無復流范圍顯著小于I/R組(41.42±5.65vs.55.12±7.84，P＜0.05)。
　　 ②與Sham組相比，I/R組及AM組再灌注后血清中SOD活性(μ/ml)明顯降低(339.14±9.52vs.479.04±8.74，431.55±4.75vs.479.04±8.7

5、4)，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05），MDA含量(nmol/ml)明顯增加(29.65±1.01vs.5.86±0.65，23.75±1.31vs.5.86±0.65)，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與I/R組相比，再灌注后AM組血清中SOD活性(μ/ml)明顯增高(431.55±4.75vs.339.14±9.52)，MDA含量(nmol/ml)明顯降低(23.75±1.31vs.29.65±1.01)，差異均有統(tǒng)計學意

6、義（P＜0.05）。
　　 ③與Sham組相比，I/R組、AM組細胞凋亡率明顯增加(16.01±1.50vs.3.47±0.67，7.02±1.13vs.3.47±0.67，P＜0.05);與I/R組相比，AM組細胞凋亡率明顯降低(7.02±1.13vs.16.01±1.50，P＜0.05)。
　　 ④與Sham組相比，I/R組、AM組Bcl-2基因蛋白表達明顯增加(3.83±0.89vs.2.57±0.76，5.76±

7、1.14vs.2.57±0.76)，Bax基因蛋白表達明顯增加(10.25±0.73vs.1.31±0.65，6.24±1.36vs.1.31±0.65)，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與I/R組相比，AM組Bcl-2基因蛋白表達明顯增加(5.76±1.14vs.3.83±0.89，P＜0.05);Bax基因蛋白表達明顯減少(6.24±1.36vs.10.25±0.73，P＜0.05);與I/R組相比，AM組Bcl-2/Bax值