丹酚酸B對心肌缺血-再灌注損傷的保護作用及機制研究.pdf

1、【背景】
　　冠心病(coronaryarteryheartdisease,CHD)為嚴重威脅健康的主要疾病,伴隨著冠脈內溶栓(thrombolytictherapy)和冠脈搭橋(coronaryarterybypassgraftsurgery,CABG)等治療手段的廣泛應用,繼之出現(xiàn)的心肌缺血/再灌注(myocardialischemia/reperfusion,MI/R)損傷日益受到醫(yī)藥學家的高度關注。到目前為止,醫(yī)藥學家普遍

2、認為:氧自由基釋放、鈣離子超載、炎癥反應、細胞能量代謝障礙等為引起MI/R損傷的主要因素。因此,尋找能夠減輕或者逆轉以上致病因素的藥物不失為一種防治MI/R損傷的策略。
　　中藥(traditionalChinesemedicine,TCM)治療MI/R損傷療效確切、前景廣闊。其中丹參(RadixSalviamiltiorrhiza)心肌保護作用的研究最為引人關注?，F(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn):丹參具有擴張冠狀動脈、防止心肌缺血和心肌梗死、

3、改善微循環(huán)、降低心肌耗氧量等作用,被廣泛應用于臨床心腦血管系統(tǒng)疾病的治療。丹酚酸B(salvianolicacidB,SalB)是丹參的水溶性成分,常常以鎂鹽的形式存在,即丹酚酸B鎂(magnesiumlithospermateB,MLB)。有研究報道SalB對大鼠MI/R損傷具有保護作用,但其作用機制尚不明確。為了進一步研究其治病機理,立項本實驗,研究SalB對MI/R損傷的保護作用及作用機制。
　　【目的】
　　1)構建

4、SD大鼠MI/R損傷模型,研究SalB對MI/R的保護作用及其機制。
　　2)構建H9c2心肌細胞SI/R損傷模型,研究SalB對SI/R的保護作用及其機制。
　　【方法】
　　第一部分:采用結扎冠狀動脈復制大鼠MI/R(30min/3h)損傷模型。
　　1)心功能檢測指標:LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax;
　　2)心肌損傷血清生化指標:cTnI、CK-MB;
　　3)抗

5、氧化血清生化指標:SOD、MDA;
　　4)抗炎血清生化指標:IL-1、IL-6、TNF-α;
　　5)EvanBlue&TTC染法評價大鼠心肌梗死面積:RZ(％)、IZ(%);
　　6)Hematoxylin&Eosin染色分析心肌組織病理改變;
　　7)心肌組織酶的表達:SOD、MPO;
　　8)Westernblot檢測:Nrf2、NF-κB。
　　第二部分:采用H9c2心肌細胞模擬缺血/再灌注

6、(Simulatedischemia/reperfusion,SI/R,2h/24h)損傷模型。
　　1)H9c2心肌細胞存活率:MTT;
　　2)細胞損傷相關酶檢測:CK-MB、LDH;
　　3)細胞凋亡檢測:AnnexinV-FITC/PI、Hoechest33258;
　　4)Westernblot檢測:Akt、e-NOS。
　　【結果】
　　第一部分:揭示MLB可以改善MI/R損傷大鼠心功能;

7、抑制心肌損傷酶cTnI、CK-MB的合成與釋放;降低超氧化物歧化酶SOD的活力,同時減少脂質過氧化產(chǎn)物MDA的含量;抑制血清中炎癥因子IL-1、IL-6及TNF-α的釋放。MLB能夠顯著降低大鼠心肌梗死面積,逆轉心肌組織的病理學改變,升高心肌組織當中的SOD活力,降低MPO的活力,同時抑制心肌組織中NF-κB的表達,升高Nrf2的表達。
　　第二部分:MLB提高了H9c2心肌細胞活力,降低了細胞上清中CK-MB、LDH的釋放,抑制