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文檔簡(jiǎn)介
1、【背景】
冠心病(coronaryarteryheartdisease,CHD)為嚴(yán)重威脅健康的主要疾病,伴隨著冠脈內(nèi)溶栓(thrombolytictherapy)和冠脈搭橋(coronaryarterybypassgraftsurgery,CABG)等治療手段的廣泛應(yīng)用,繼之出現(xiàn)的心肌缺血/再灌注(myocardialischemia/reperfusion,MI/R)損傷日益受到醫(yī)藥學(xué)家的高度關(guān)注。到目前為止,醫(yī)藥學(xué)家普遍
2、認(rèn)為:氧自由基釋放、鈣離子超載、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞能量代謝障礙等為引起MI/R損傷的主要因素。因此,尋找能夠減輕或者逆轉(zhuǎn)以上致病因素的藥物不失為一種防治MI/R損傷的策略。
中藥(traditionalChinesemedicine,TCM)治療MI/R損傷療效確切、前景廣闊。其中丹參(RadixSalviamiltiorrhiza)心肌保護(hù)作用的研究最為引人關(guān)注。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn):丹參具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、防止心肌缺血和心肌梗死、
3、改善微循環(huán)、降低心肌耗氧量等作用,被廣泛應(yīng)用于臨床心腦血管系統(tǒng)疾病的治療。丹酚酸B(salvianolicacidB,SalB)是丹參的水溶性成分,常常以鎂鹽的形式存在,即丹酚酸B鎂(magnesiumlithospermateB,MLB)。有研究報(bào)道SalB對(duì)大鼠MI/R損傷具有保護(hù)作用,但其作用機(jī)制尚不明確。為了進(jìn)一步研究其治病機(jī)理,立項(xiàng)本實(shí)驗(yàn),研究SalB對(duì)MI/R損傷的保護(hù)作用及作用機(jī)制。
【目的】
1)構(gòu)建
4、SD大鼠MI/R損傷模型,研究SalB對(duì)MI/R的保護(hù)作用及其機(jī)制。
2)構(gòu)建H9c2心肌細(xì)胞SI/R損傷模型,研究SalB對(duì)SI/R的保護(hù)作用及其機(jī)制。
【方法】
第一部分:采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈復(fù)制大鼠MI/R(30min/3h)損傷模型。
1)心功能檢測(cè)指標(biāo):LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax;
2)心肌損傷血清生化指標(biāo):cTnI、CK-MB;
3)抗
5、氧化血清生化指標(biāo):SOD、MDA;
4)抗炎血清生化指標(biāo):IL-1、IL-6、TNF-α;
5)EvanBlue&TTC染法評(píng)價(jià)大鼠心肌梗死面積:RZ(%)、IZ(%);
6)Hematoxylin&Eosin染色分析心肌組織病理改變;
7)心肌組織酶的表達(dá):SOD、MPO;
8)Westernblot檢測(cè):Nrf2、NF-κB。
第二部分:采用H9c2心肌細(xì)胞模擬缺血/再灌注
6、(Simulatedischemia/reperfusion,SI/R,2h/24h)損傷模型。
1)H9c2心肌細(xì)胞存活率:MTT;
2)細(xì)胞損傷相關(guān)酶檢測(cè):CK-MB、LDH;
3)細(xì)胞凋亡檢測(cè):AnnexinV-FITC/PI、Hoechest33258;
4)Westernblot檢測(cè):Akt、e-NOS。
【結(jié)果】
第一部分:揭示MLB可以改善MI/R損傷大鼠心功能;
7、抑制心肌損傷酶cTnI、CK-MB的合成與釋放;降低超氧化物歧化酶SOD的活力,同時(shí)減少脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA的含量;抑制血清中炎癥因子IL-1、IL-6及TNF-α的釋放。MLB能夠顯著降低大鼠心肌梗死面積,逆轉(zhuǎn)心肌組織的病理學(xué)改變,升高心肌組織當(dāng)中的SOD活力,降低MPO的活力,同時(shí)抑制心肌組織中NF-κB的表達(dá),升高Nrf2的表達(dá)。
第二部分:MLB提高了H9c2心肌細(xì)胞活力,降低了細(xì)胞上清中CK-MB、LDH的釋放,抑制
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