攜帶Il-24基因的Ki167啟動子調(diào)控增殖腺病毒對人黑素瘤裸鼠移植瘤生長抑制作用的實驗研究.pdf

1、目的：應(yīng)用攜帶IL-24基因的Ki67啟動子調(diào)控增殖腺病毒Ki67-ZD55-IL24，觀察其對人黑素瘤裸鼠移植瘤的治療效果，為臨床治療黑素瘤奠定實驗基礎(chǔ)。
　　方法：建立裸鼠黑素瘤移植瘤模型，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別給予PBS、ZD55-EGFP、Ki67-ZD55、ZD55-IL24和Ki67-ZD55-IL24單獨(dú)治療。病毒注射后第7天每組隨機(jī)處死4只動物，RT-PCR法檢測IL-24 mRNA表達(dá)，免疫印跡法檢測EI

2、A蛋白和IL-24蛋白表達(dá)情況，TUN EL法檢測腫瘤組織凋亡，免疫組化法檢測BAX、Bcl-2和Caspase-3蛋白表達(dá)。余動物繼續(xù)測量腫瘤體積繪制腫瘤生長曲線，在干預(yù)后第30天處死動物，剝離移植瘤并稱量瘤重。
　　結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示Ki67-ZD55-IL24和ZD55-IL24都能將IL-24基因轉(zhuǎn)入到腫瘤組織中；免疫印跡法檢測結(jié)果顯示Ki67-ZD55-IL24組和ZD55-IL24組都可以使腫瘤組織表達(dá)EIA蛋

3、白和IL-24蛋白，Ki67-ZD55-IL24組表達(dá)比ZD55-IL24組明顯增高(P<0.05)；TUNEL檢測結(jié)果顯示Ki67-ZD55-IL24組凋亡指數(shù)明顯高于ZD55-EGFP組、Ki67-ZD55組和ZD55-IL24組(P<0.05)；免疫組化結(jié)果顯示Ki67-ZD55-IL24組BAX表達(dá)明顯上調(diào)、Bcl-2表達(dá)明顯下調(diào)，Procaspase-3發(fā)生明顯剪切；腫瘤生長曲線顯示Ki67-ZD55-IL24組比ZD55-E

4、G FP組、Ki67-ZD55組和ZD55-IL24組對裸鼠移植瘤的生長抑制作用更強(qiáng)(P<0.05)，干預(yù)后第30天Ki67-ZD55-IL24組瘤重明顯小于ZD55-EGFP組、Ki67-ZD55組和ZD55-IL24組(P<0.05)。
　　結(jié)論：攜帶IL-24基因的Ki67啟動子調(diào)控增殖腺病毒Ki67-ZD55-IL24能夠明顯抑制人黑素瘤裸鼠移植瘤的生長，其抑瘤作用明顯強(qiáng)于ZD55-EGFP、Ki67-ZD55和ZD55-