攜帶mda-7基因的腺病毒聯(lián)合達卡吧嗪對人黑素瘤裸鼠移植瘤生長抑制作用的實驗研究.pdf

1、目的:聯(lián)合應(yīng)用攜帶mda-7基因的腺病毒Ad.mda-7與DTIC,觀察其對人A375黑素瘤裸鼠移植瘤的治療效果,為臨床治療黑素瘤奠定實驗基礎(chǔ)。
　　 方法:建立裸鼠黑素瘤移植瘤模型,隨機分為4組,每組8只,分別給予PBS、Ad.mda-7單獨治療、DTIC單獨治療、Ad.mda-7聯(lián)合DTIC治療。病毒注射后第7天每組隨機處死4只動物,RT-PCR法檢測MDA-7 mKNA表達,免疫印跡法檢測MDA-7蛋白表達情況,TUNEL

2、法檢測腫瘤組織凋亡,免疫組化法檢測BAX、Bcl-2、VEGF蛋白表達。余動物繼續(xù)測量腫瘤體積繪制腫瘤生長抑制曲線,在治療第30天時處死動物,稱量移植瘤瘤重。
　　 結(jié)果:RT-PCR法與免疫印跡法顯示Ad.mda-7單用或與DTIC聯(lián)合應(yīng)用都可使腫瘤組織表達MDA-7 mRNA和MDA-7蛋白,兩治療組之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異,DTIC不影響MDA-7蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯:TUNEL檢測顯示聯(lián)合治療組的凋亡指數(shù)明顯高于各單獨應(yīng)用組(P＜

3、0.05)和PBS組(PO＜0.05);免疫組化顯示Ad.mda-7與DTIC都可以上調(diào)BAX的表達、下調(diào)Bcl-2表達,抑制VEGF表達,與單獨應(yīng)用相比二者聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生的作用更為顯著(P＜0.05);腫瘤生長曲線顯示Ad.mda-7與DTIC聯(lián)合應(yīng)用具有抑制腫瘤生長的效果,與DTIC單獨應(yīng)用相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.022);Ad.mda-7組瘤重與DTIC組瘤重均小于PBS組(P＜0.05),聯(lián)合治療組瘤重分別小于二者單用組(P