腎細(xì)胞癌中Wif-1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)與mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、目的:Wif-1（Wnt inhibitory factor-1，Wif-1）是Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的一個(gè)重要抑制因子，國(guó)內(nèi)外大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在眾多惡性腫瘤中存在Wif-1的表達(dá)異?；騿?dòng)子區(qū)的高甲基化，提示啟動(dòng)子區(qū)的高甲基化可能是腫瘤發(fā)生機(jī)制之一。但是該基因在腎細(xì)胞癌(Renal Cell Carcinoma，RCC)中的研究較少，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(Methylation-Specific PCR，MSP)和逆轉(zhuǎn)錄-聚

2、合酶鏈反應(yīng)(ReverseTranscriptase-PCR，RT-PCR)探討RCC組織及正常腎組織中Wif-1基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)與mRNA表達(dá)水平，并研究它們與臨床資料之間的關(guān)系，為RCC的發(fā)病機(jī)制、臨床診斷及治療提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:
　　1應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(Methylation-Specific PCR，MSP)檢測(cè)56例RCC組織及正常腎組織中Wif-1基因甲基化狀態(tài)，并分析該基因甲基化在

3、RCC發(fā)生發(fā)展中的作用以及與臨床資料之間的關(guān)系。
　　2應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcriptase-PCR，RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)Wif-1基因mRNA在56例RCC組織及正常腎組織中的相對(duì)表達(dá)量，并分析在RCC組織中Wif-1基因mRNA相對(duì)表達(dá)量與臨床資料之間的關(guān)系。
　　3應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　156例RCC組織和56例正常腎組織中Wi

4、f-1基因啟動(dòng)子的甲基化情況以及RCC組織中甲基化與臨床資料之間的研究。
　　Wif-1基因在RCC組織甲基化率分別是46.4％(26/56)明顯高于正常腎組織的甲基化率3.6％(2/56)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但是Wif-1的甲基化率與性別、年齡、臨床分期及腫瘤大小等臨床資料無(wú)明顯關(guān)系。
　　256例RCC組織和56例正常腎組織中Wif-1基因mRNA相對(duì)表達(dá)量情況，以及RCC組織中Wif-1基因mRNA相對(duì)

5、表達(dá)量與臨床資料之間的關(guān)系。
　　Wif-1基因mRNA在RCC組織中的相對(duì)表達(dá)量0.65±0.17低于正常腎組織mRNA的相對(duì)表達(dá)量0.77±0.06，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0.05，兩組差異有意義。但是Wif-1基因mRNA相對(duì)表達(dá)量與年齡、性別、腫瘤大小等臨床資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3在RCC組織中，Wif-1基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量在甲基化陽(yáng)性病例中為0.68±0.17高于甲基化陰性病例中mRNA的相對(duì)表達(dá)量0.63±0

6、.17，P＞0.05，但是差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1 RCC組織中Wif-1基因的甲基化率46.4％(26/56)明顯高于正常腎組織的甲基化率3.6％(2/56)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0.05，兩組甲基化率的差異有意義，該研究提示W(wǎng)if-1基因啟動(dòng)子區(qū)的高甲基化在RCC的發(fā)生中是一個(gè)常見(jiàn)事件，并且可能參與RCC的發(fā)生。
　　2 Wif-1基因mRNA在RCC組織中的相對(duì)表達(dá)量0.65±0.17低于正常腎組織中

7、的相對(duì)表達(dá)量0.77±0.06，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0.05，提示W(wǎng)if-1基因mRNA表達(dá)的降低可能參與RCC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
　　3在RCC組織中，Wif-1基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量在甲基化陽(yáng)性病例中為0.68±0.17高于甲基化陰性病例中mRNA的相對(duì)表達(dá)量0.63±0.17，P＞0.05，但是差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示W(wǎng)if-1基因啟動(dòng)子高甲基化可能只是RCC中的一個(gè)常見(jiàn)事件，而不會(huì)導(dǎo)致其mRNA表達(dá)的降低，其表達(dá)降低的具體原因