腎細胞癌中Wif-1基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)與mRNA表達的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:Wif-1(Wnt inhibitory factor-1,Wif-1)是Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的一個重要抑制因子,國內(nèi)外大量實驗發(fā)現(xiàn)在眾多惡性腫瘤中存在Wif-1的表達異常或啟動子區(qū)的高甲基化,提示啟動子區(qū)的高甲基化可能是腫瘤發(fā)生機制之一。但是該基因在腎細胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)中的研究較少,本實驗通過應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(Methylation-Specific PCR,MSP)和逆轉(zhuǎn)錄-聚

2、合酶鏈反應(yīng)(ReverseTranscriptase-PCR,RT-PCR)探討RCC組織及正常腎組織中Wif-1基因啟動子甲基化狀態(tài)與mRNA表達水平,并研究它們與臨床資料之間的關(guān)系,為RCC的發(fā)病機制、臨床診斷及治療提供一定的理論依據(jù)。
  方法:
  1應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(Methylation-Specific PCR,MSP)檢測56例RCC組織及正常腎組織中Wif-1基因甲基化狀態(tài),并分析該基因甲基化在

3、RCC發(fā)生發(fā)展中的作用以及與臨床資料之間的關(guān)系。
  2應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)技術(shù)檢測Wif-1基因mRNA在56例RCC組織及正常腎組織中的相對表達量,并分析在RCC組織中Wif-1基因mRNA相對表達量與臨床資料之間的關(guān)系。
  3應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS17.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。
  結(jié)果:
  156例RCC組織和56例正常腎組織中Wi

4、f-1基因啟動子的甲基化情況以及RCC組織中甲基化與臨床資料之間的研究。
  Wif-1基因在RCC組織甲基化率分別是46.4%(26/56)明顯高于正常腎組織的甲基化率3.6%(2/56),P<0.05,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。但是Wif-1的甲基化率與性別、年齡、臨床分期及腫瘤大小等臨床資料無明顯關(guān)系。
  256例RCC組織和56例正常腎組織中Wif-1基因mRNA相對表達量情況,以及RCC組織中Wif-1基因mRNA相對

5、表達量與臨床資料之間的關(guān)系。
  Wif-1基因mRNA在RCC組織中的相對表達量0.65±0.17低于正常腎組織mRNA的相對表達量0.77±0.06,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,P<0.05,兩組差異有意義。但是Wif-1基因mRNA相對表達量與年齡、性別、腫瘤大小等臨床資料無統(tǒng)計學(xué)意義。
  3在RCC組織中,Wif-1基因mRNA的相對表達量在甲基化陽性病例中為0.68±0.17高于甲基化陰性病例中mRNA的相對表達量0.63±0

6、.17,P>0.05,但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
  結(jié)論:
  1 RCC組織中Wif-1基因的甲基化率46.4%(26/56)明顯高于正常腎組織的甲基化率3.6%(2/56),經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,P<0.05,兩組甲基化率的差異有意義,該研究提示W(wǎng)if-1基因啟動子區(qū)的高甲基化在RCC的發(fā)生中是一個常見事件,并且可能參與RCC的發(fā)生。
  2 Wif-1基因mRNA在RCC組織中的相對表達量0.65±0.17低于正常腎組織中

7、的相對表達量0.77±0.06,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,P<0.05,提示W(wǎng)if-1基因mRNA表達的降低可能參與RCC的發(fā)生發(fā)展過程。
  3在RCC組織中,Wif-1基因mRNA的相對表達量在甲基化陽性病例中為0.68±0.17高于甲基化陰性病例中mRNA的相對表達量0.63±0.17,P>0.05,但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義,提示W(wǎng)if-1基因啟動子高甲基化可能只是RCC中的一個常見事件,而不會導(dǎo)致其mRNA表達的降低,其表達降低的具體原因

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