腎透明細胞癌中DCC基因的表達情況及其與DCC基因啟動子區(qū)甲基化的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:觀察在腎透明細胞癌(Clear Cell Renal Cell Carcinoma，ccRCC)和癌旁腎組織中直結(jié)腸癌缺失基因(Deleted in Colorectal Carcinoma Gene，DCC)的表達和相應(yīng)組織中DCC基因啟動子區(qū)異常甲基化的情況，分析DCC基因在腎透明細胞癌中的表達情況及其啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)與臨床病理學(xué)因素（性別、發(fā)病年齡、病理分級、臨床分期、腫瘤大小、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及有無大血管浸潤）之

2、間的相互關(guān)系，同時觀察其對腎透明細胞癌患者預(yù)后的影響。并進一步探討腎透明細胞癌中DCC基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)與DCC中表達之間的關(guān)聯(lián)性，從而為研究DCC在腎透明細胞癌發(fā)生和發(fā)展中的作用及其可能的分子機制提供相關(guān)線索。
　　方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法（超敏型S-P法）檢測132例腎透明細胞癌組織及其相應(yīng)癌旁組織中DCC蛋白的表達情況，并通過DNA甲基化特異性PCR(Methylation specific PCR，MSP)檢測50例

3、腎透明細胞癌組織及相應(yīng)癌旁組織中DCC基因啟動子甲基化的情況，對上述結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析，確定差異是否具有統(tǒng)計學(xué)意義。進一步分析在腎透明細胞癌中DCC蛋白的表達與DCC基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)之間的關(guān)聯(lián)性。
　　結(jié)果:
　　1、腎透明細胞癌及其癌旁組織中DCC蛋白的表達情況DCC在腎透明細胞癌組織和癌旁組織中的陽性表達率分別為39.39％，100.00％; DCC在腎透明細胞癌中的表達與癌旁組織相比較，腫瘤組織顯著低于癌旁組織，

4、差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2、DCC在腎透明細胞癌中表達與腎癌臨床病理參數(shù)間的關(guān)系腎透明細胞癌組織中DCC的表達與TNM分期、病理分級、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及大血管浸潤間存在相關(guān)性(P＜0.05);與患者年齡，性別，腫瘤大小無關(guān)(P＞0.05)。
　　3、DCC在腎透明細胞癌中表達對患者預(yù)后的影響在隨訪期間，44例患者(33.33％)死亡，隨訪時間是12個月至84個月，中位時間為60個月。Kaplan-Me

5、ier繪制DCC陽性與陰性生存曲線，Log-rank顯示其生存期差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.011)。進一步行COX單因素及多因素分析顯示:DCC的表達情況、TNM分期、腫瘤分級、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及大血管浸潤，是腎透明細胞癌的獨立影響因子。
　　4、腎透明細胞癌及癌旁組織中DCC基因啟動子甲基化狀態(tài)腎透明細胞癌組織中DCC基因啟動子區(qū)甲基化發(fā)生率(39/5078.0％)高于癌旁組織(11/5022.0％)，兩者存在顯著差異

6、(P＜0.001)。
　　5、腎透明細胞癌中DCC基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)與腎癌臨床病理參數(shù)間的關(guān)系腎透明細胞癌組織中DCC基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)與TNM分期、病理分級、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠處轉(zhuǎn)移間存在相關(guān)性(P＜0.05);與患者年齡，性別，腫瘤大小及大血管浸潤無關(guān)(P＞0.05)。
　　6、腎透明細胞癌組織中DCC失表達與DCC基因啟動子甲基化狀態(tài)的關(guān)聯(lián)性腎透明細胞癌中DCC蛋白失表達組的甲基化率(29/3096.6％)明顯

7、高于DCC表達組的甲基化(10/2050％)，兩者存在明顯差異(P＜0.05); DCC基因在腎透明細胞癌中的表達情況與DCC基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)之間存在關(guān)聯(lián)性（相關(guān)系數(shù)-0.552），在DCC基因啟動子區(qū)甲基化增加時，會出現(xiàn)DCC表達的下調(diào)。
　　結(jié)論:
　　1、DCC基因在腎透明細胞癌組織中確實存在表達缺失，且與腎透明細胞癌的病理分級、臨床分期、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及大血管浸潤間存在相關(guān)性，提示DCC蛋白失表達可能

8、促進腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，在腎透明細胞癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用。并且Cox生存分析提示DCC表達情況是影響患者預(yù)后的獨立因素。通過檢測腎透明細胞癌中DCC蛋白的表達有助于疾病診斷，為制定治療方案提供依據(jù)，是腎透明細胞癌診治和預(yù)后很有價值的生物學(xué)指標(biāo)。
　　2、腎透明細胞癌中存在高頻率的DCC基因啟動子區(qū)甲基化的發(fā)生，且與腎透明細胞癌的病理分級、臨床分期、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠處轉(zhuǎn)移間存在相關(guān)性，提示DCC基因啟動子區(qū)甲基化升高可能促進腫瘤的

9、侵襲和轉(zhuǎn)移，在腎透明細胞癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用。檢測DCC基因啟動子區(qū)甲基化的狀態(tài)對提高腎透明細胞癌患者的診治水平具有一定的臨床價值。
　　3、DCC基因啟動子區(qū)甲基化可能是導(dǎo)致腎透明細胞癌中DCC失表達的主要機制之一。DCC基因在腎透明細胞癌中的表達與DCC基因啟動子區(qū)甲基化之間存在關(guān)聯(lián)性，DCC基因啟動子區(qū)甲基化增加時，會出現(xiàn)DCC表達的下調(diào)。本研究為抑制惡性腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移提供了新的研究方向，DCC基因有可能成為腫瘤新