山羊痘病毒N1L基因缺失重組毒株的構(gòu)建及其生物特性研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩78頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、本研究以GTPV基因組為模板，以N1L基因側(cè)翼序列為同源重組左右臂構(gòu)建了表達綠色熒光蛋白及黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶的轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒pLR-EGFP-gpt。將pLR-EGFP-gpt與GTPV共轉(zhuǎn)染Vero細胞（非洲綠猴腎細胞）并在細胞內(nèi)發(fā)生同源重組，通過加壓篩選純化出缺失N1L基因的重組病毒GTPV△N1L。采用相同方法在pLR-EGFP-gpt中反向插入N1L基因表達盒構(gòu)建了N1基因缺失后再拯救的重組轉(zhuǎn)移載體pLR-EGFP-gp

2、t-N1Lrev，并與GTPV共轉(zhuǎn)染后篩選出恢復(fù)突變的重組病毒GTPV N1Lrev。遺傳穩(wěn)定性和生物學(xué)特性鑒定證實，GTPV△N1L能在至少10代內(nèi)穩(wěn)定遺傳，且在細胞病變和生長性能等方面與親本毒株相比均未發(fā)生顯著改變，但是相同毒價的GTPV△N1L與親本毒株在病毒拷貝數(shù)上相差30倍，初步證實缺失N1L基因并沒有對病毒在培養(yǎng)細胞中復(fù)制產(chǎn)生太大影響，但是使病毒毒力有一定程度的降低，表明N1L可能為病毒毒力因子之一。
　　擴增GTPV

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論