三氧化二砷對TNF-α誘導的人類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞Ras-p38 MAPK通路的調控研究.pdf

1、 目的：
1.觀察TNF-α對RA FLS的Ras-p38MAPK信號通路活化水平的影響。2.觀察不同濃度的ATO對TNF-α誘導的Ras-p38 MAPK信號通路活化水平的影響。
方法：
1.從 RA 患者的膝關節(jié)腔積液中獲取標本進行原代培養(yǎng) RA FLS 細胞。培養(yǎng)至第3代即獲得純化的RA FLS細胞。
2.使用 10μg/L 的 TNF-α 與第 3 代 RA FLS 共孵

2、育 30min,運用Western-blot檢測其與空白對照組的Ras、p-p38的表達水平。
3.將三種不同濃度的ATO(0.5μmol/L、5μmol/L 、25μmol/L)與RA FLS細胞共孵育24h,然后終止反應,將10μg/L TNF-α與之共孵育30min ,終止反應進行Western blot檢測每個組的Ras、p-p38的表達水平。
結果：
1.原代培養(yǎng)有較多的巨噬細胞,隨著

3、傳代的進行,其逐漸被去除。到第三代培養(yǎng)的細胞基本上都是RA FLS細胞。
2.TNF-α刺激后的RA FLS,通過Western blot檢測表明Ras, p-p38表達水平明顯升高。(p<0.05)
3.相對于 TNF-α 誘導組,ATO 組能夠降低 TNF-α 誘導 RA FLS 的Ras-p38 MAPK通路活化時Ras、p-p38的表達水平,這種抑制作用呈劑量依耐性。(p<0.05)
結