2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:探討赤芍801對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)成纖維樣滑膜細(xì)胞(Fibroblast-like synoviocytes,F(xiàn)LS)凋亡的影響。
  方法:RA患者關(guān)節(jié)滑液經(jīng)原代培養(yǎng)分離出FLS,取3-5代的RAFLS用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制。根據(jù)MTT結(jié)果,將細(xì)胞分為高劑量赤芍801組(64μg/ml)、低劑量赤芍801組(4μg/ml)和溶劑對(duì)照組,光學(xué)顯微鏡觀察其細(xì)胞形態(tài);An

2、nexin V-FITC/PI雙標(biāo)記染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;逆轉(zhuǎn)錄PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Fas/FaslmRNA相對(duì)表達(dá)量;細(xì)胞免疫化學(xué)方法對(duì)P65和P50表達(dá)定位進(jìn)行分析;提取核蛋白,采用免疫印跡方法檢測(cè)P65和P50表達(dá)。
  結(jié)果:經(jīng)過(guò)反復(fù)貼壁與傳代以后,3~5代滑膜細(xì)胞逐漸純化,RA FLS在無(wú)赤芍801刺激下絕大多數(shù)為長(zhǎng)梭形,少量呈星形、多角形,胞質(zhì)透亮、均勻,核居中,排列具有局部方向性,低劑量赤芍801刺激24h后

3、無(wú)明顯改變,但高劑量赤芍801刺激后發(fā)生明顯改變:細(xì)胞由長(zhǎng)梭形變成了不規(guī)則形或圓形,細(xì)胞密度明顯降低,體積縮小,核出現(xiàn)固縮,但胞膜和核膜完整。MTT結(jié)果顯示,赤芍801具有濃度依賴(lài)性的抑制RA FLS增殖功能,并在4μg/ml劑量下有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。流式結(jié)果表明,赤芍801具有誘導(dǎo)RAFLS凋亡功能,雖然低劑量組的凋亡率與對(duì)照組比較增加不明顯,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,但高劑量組的凋亡率較對(duì)照組顯著增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<

4、0.05。逆轉(zhuǎn)錄PCR結(jié)果顯示,F(xiàn)as mRNA在RAFLS中有表達(dá),且有隨赤芍801濃度增加而表達(dá)增加趨勢(shì),但Fasl mRNA在RA FLS中未被檢測(cè)出。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果指出,低劑量赤芍801刺激的RA FLS Fas mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組增加不明顯,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,但高劑量差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。細(xì)胞免疫化學(xué)結(jié)果顯示,P65和P50蛋白在無(wú)赤芍801刺激作用下,主要在RA FLS細(xì)胞漿中被

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