CCK-8構(gòu)建人工神經(jīng)橋接修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 通過實驗，觀察神經(jīng)再生室內(nèi)八肽膽囊收縮素（CCK-8）對坐骨神經(jīng)缺損修復(fù)的效果，探索CCK-8構(gòu)建人工神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的作用機制，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
　　 材料與方法
　　 將健康Wistar大鼠隨機分為三組：每組16只，實驗組為A、B兩組：A組為導(dǎo)管內(nèi)注射CCK-8組，B組為腹腔內(nèi)注射CCK-8組，對照組為C組（導(dǎo)管內(nèi)注射生理鹽水），實驗?zāi)Ｐ筒捎米巧窠?jīng)缺損端置PLGA導(dǎo)管構(gòu)建神經(jīng)再生室。A

2、組大鼠一次性在導(dǎo)管內(nèi)注入CCK-8（56nmol/kg），B組大鼠腹腔內(nèi)注射CCK-8（8nmol/kg），每天一次，一共給藥7天，導(dǎo)管內(nèi)一次性注滿生理鹽水。對照組C組一次性在導(dǎo)管內(nèi)注滿生理鹽水。飼養(yǎng)大鼠12周。綜合采用七個指標(biāo)進行坐骨神經(jīng)恢復(fù)程度評價：（1）運動行為學(xué)：分別在術(shù)后第8周和第12周時，采用肉眼觀察。（2）再生神經(jīng)外觀形態(tài)：分別在術(shù)后第8周和第12周時，采用肉眼觀察。（3）坐骨神經(jīng)功能指數(shù)的恢復(fù)率（SFI％）：采用步態(tài)分析

3、法測定。（4）神經(jīng)電生理（NEP）：采用測定運動神經(jīng)傳導(dǎo)數(shù)度的恢復(fù)率（NCV％）和腓腸肌復(fù)合動作電位的恢復(fù)率（CMAP％）法。（5）再生神經(jīng)組織學(xué)結(jié)構(gòu)的比較：采用HE染色、固綠髓鞘染色處理再生坐骨神經(jīng)標(biāo)本，光鏡下觀察。（6）有髓神經(jīng)纖維計數(shù)的恢復(fù)率（％）。（7）腓腸肌濕重的恢復(fù)率（％）。
　　 結(jié)果：
　　 48只大鼠全部成活。（1）運動行為學(xué)：術(shù)后第8周，三組均見小腿肌肉萎縮A、B兩組大鼠鼠爪出現(xiàn)部分收展及伸屈活動，A

4、組明顯，C組則無以上活動表現(xiàn)；術(shù)后第12周，A組實驗側(cè)小腿肌基本恢復(fù)至正常，足趾收展及伸屈活動基本正常；B組實驗側(cè)小腿肌與健側(cè)比有差異，尚飽滿，足趾收展伸屈活動尚可；C組實驗側(cè)小腿肌明顯萎縮，足趾收展伸屈活動明顯受限。（2）再生神經(jīng)外觀形態(tài)：肉眼形態(tài)：術(shù)后第8周，A組和B組管內(nèi)再生神經(jīng)通過，神經(jīng)外觀凸凹粗糙，B組明顯，C組管內(nèi)未見再生神經(jīng)通過。術(shù)后第12周，A組再生神經(jīng)纖維完全自近端長入遠(yuǎn)端，粗細(xì)基本正常，外形勻稱；B組再生神經(jīng)纖維基本

5、自近端長入遠(yuǎn)端，直徑較細(xì)，表面凸凹粗糙。C組再生神經(jīng)纖維基本自近端長入遠(yuǎn)端，直徑明顯細(xì)于A組，表面明顯凸凹粗糙。A組優(yōu)于B組，B組優(yōu)于C組。（3）SFI％：術(shù)后第8周，A組：-51.04±6.77％，B組：-61.12±8.77％，C組：-72.87±5.85％：術(shù)后第12周，A組：-34.15±5.57％，B組：-42.29±6.72％，C組：-52.99±7.80％，三組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。（4）NEP測定：術(shù)后第8周，A組NCV％

6、：42.62±0.43％，CMAP％：64.16±0.98％，B組NCV％：35.73±0.28％，CMAP％：55.28±0.89％；C組NCV％：23.53±0.76％，CMAP％：34.97±0.71％，三組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；術(shù)后第12周，A組NCV％：57.23±0.43％，CMAP％：92.60±2.63％；B組NCV％：36.26±0.29％，CMAP％：83.40±3.00％；C組NCV％：23.50±0.61％，CMA

7、P％：64.01±1.28％；三組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。（5）組織學(xué)結(jié)構(gòu)：再生神經(jīng)纖維密度高低、排列規(guī)則程度方面比較，術(shù)后第8周，A、B、C組密度和排列規(guī)則度依次遞減；術(shù)后第12周，再生神經(jīng)纖維排列規(guī)則度、髓鞘厚度方面比較，A、B、C組排列規(guī)則度、髓鞘厚度依次遞減，A組基本正常。（6）再生有髓纖維計數(shù)恢復(fù)率測定：術(shù)后第8周A組為63.24±6.65％，B組52.08±3.37％，C組為37.69±6.37％，三組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。術(shù)后

8、第12周：A組為81.59±3.24％，B組72.48±5.37％，C組為62.37±7.91％。（7）腓腸肌濕重的恢復(fù)率測定：術(shù)后第8周：A組為65.45±1.20％，B組60.50±1.44％，C組為53.05±0.74％，三組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；術(shù)后第12周，A組為78.14±0.38％，B組66.32±1.70％，C組為54.62±1.04％，三組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論
　　 1神經(jīng)缺損端局部應(yīng)用CC