絲裂霉素膀胱熱灌注化療的藥代動(dòng)力學(xué)和臨床療效及安全性研究.pdf

1、膀胱癌是泌尿系統(tǒng)中最常見的腫瘤。膀胱癌的臨床上組織學(xué)分類主要有四類，包括移行細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺癌及部分混合細(xì)胞癌，其中以移行細(xì)胞癌（TCC）最為常見。臨床習(xí)慣將乳頭狀癌（Ta）和浸潤深度只限于固有層移行細(xì)胞癌（T1期）及原位癌（Tis）稱為表淺性膀胱癌（SBC）或非肌層浸潤性膀胱癌（NMIBC)。經(jīng)尿道腫瘤電切術(shù)（TURBT）是目前治療膀胱癌最有效的治療方法之一，但手術(shù)后腫瘤的局部復(fù)發(fā)是目前臨床面臨的最大問題。近年來開展的熱灌注化療

2、技術(shù)（HIVEC）既可通過灌洗除去在體腔內(nèi)游離的惡性腫瘤細(xì)胞，又可通過溫?zé)岱椒ㄅc化療藥物相結(jié)合殺滅人體體腔內(nèi)殘留的惡性腫瘤細(xì)胞，預(yù)防腫瘤手術(shù)后的復(fù)發(fā)及種植性轉(zhuǎn)移，目前已有大量HIVEC用于治療TCC的報(bào)道，具有治療效果好、毒副作用小的特點(diǎn)，顯示出廣闊的臨床應(yīng)用前景。絲裂霉素C(MMC)是歐洲泌尿外科協(xié)會(huì)（EUA）推薦的膀胱腫瘤電切術(shù)后常用灌注藥物，但目前還沒有MMC作為膀胱熱灌注化療藥物的藥代動(dòng)力學(xué)研究資料，對MMC膀胱熱灌注化療防治表

3、淺性膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)的療效也缺乏相應(yīng)的探討。因此對熱灌注化療藥物MMC進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)、臨床療效和安全性研究很有必要。
　　第一部分：絲裂霉素膀胱熱灌注化療的藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　目的：
　　應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）測定5例入組患者進(jìn)行膀胱腔內(nèi)熱灌注化療時(shí)不同時(shí)間點(diǎn)的血液及灌注液中MMC濃度.。對不同時(shí)間點(diǎn)中血液及灌注液中的MMC濃度進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察，研究膀胱腔內(nèi)熱灌注化療過程中不同時(shí)間點(diǎn)的MMC的吸收量，為熱灌注化療（H

4、IVEC）的藥代動(dòng)力學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.留置實(shí)驗(yàn)標(biāo)本
　　將80 mg MMC溶于600 ml無菌生理鹽水，灌注溫度設(shè)定為45℃，灌注時(shí)間為45 min，灌注速度設(shè)定為150 ml/min行膀胱熱灌注。灌注時(shí)均分不同時(shí)間點(diǎn)留取血清和灌注液標(biāo)本，應(yīng)用高效液相色譜法檢測血液和灌注液標(biāo)本中MMC的濃度。
　　2.樣品處理方法
　　用干燥試管抽取靜脈血3~5 ml，置于保溫冰箱1~3小時(shí)；用控

5、制離心機(jī)，4℃1500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，分裝成200 ul4份，置于-80℃冰箱保存。用干燥試管留取灌注液體標(biāo)本50ml，分裝成小試管4~5份，并置于-80℃冰箱保存。
　　3. HPLC法檢測
　　取灌注液及血清樣品，經(jīng)預(yù)處理后，高效液相色譜儀（HPLC）檢測待測樣品的峰面積。
　　將測得的峰面積與該藥物不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線上的峰面積相對比，代入回歸方程計(jì)算出該藥物的測定濃度，取患者樣本測定濃度均值，繪制藥物的時(shí)間

6、-濃度變化曲線，利用DAS2.0軟件計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.以0.5-50 ng/ml為線性范圍，標(biāo)準(zhǔn)品血藥濃度為橫坐標(biāo)（x），MMC峰面積為縱坐標(biāo)(y)，作直線回歸，得出的線性方程y=bx+a：y=0.0108(±0.0001)x+0.005（±0.003），r=0.999。
　　2.取測定血漿中的MMC濃度均值，繪制藥物的時(shí)間-濃度變化曲線得出的藥時(shí)曲線下面積（AUC）為187(167~468)

7、ng/ml/min。
　　3.膀胱熱灌注化療時(shí)血液標(biāo)本中0min、15min、30min、45min及60min測定的MMC濃度（均值±標(biāo)準(zhǔn)差）分別為：3.25±3.13 ng/ml、4.57±3.82 ng/ml、5.23±3.43 ng/ml、7.65±6.24 ng/ml及7.57±5.30ng/ml。血漿中的絲裂霉素濃度峰值出現(xiàn)在45~60min，并達(dá)到平臺(tái)期。
　　4.膀胱熱灌注化療時(shí)灌注液標(biāo)本中0 min、15

8、min、30 min及45 min測定的MMC濃度（均值±標(biāo)準(zhǔn)差）分別為：85±21 ug/ml、73±18 ug/ml、68±20 ug/ml及65±16 ug/mlug/ml。
　　結(jié)論：
　　1. HIVEC時(shí)血漿內(nèi)MMC濃度較低，峰值低于骨髓抑制的閾濃度400 ng/ml。
　　2. HIVEC時(shí)膀胱內(nèi)MMC濃度較高，MMC濃度隨時(shí)間無明顯變化。
　　第二部分：絲裂霉素膀胱熱灌注化療的臨床安全性研究

9、>　　目的：
　　觀察入組患者膀胱熱灌注化療過程中生命體征變化及不良反應(yīng)，同時(shí)進(jìn)行定期隨訪，觀察HIVEC的臨床療效及毒副作用，為臨床治療的療效及安全性提供研究依據(jù)。
　　方法：
　　1.本組14例患者中男性12例，女性2例，卡氏評分90~100分?；颊呔鶠閺?fù)發(fā)的TCC或膀胱多發(fā)腫瘤患者，經(jīng)膀胱鏡活檢或手術(shù)病理證實(shí)為TCC，無嚴(yán)重肝腎功能不全及心肺疾病，入院后腰硬麻下行經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切術(shù)。患者行膀胱熱灌注化療3次，將

10、80 mg MMC溶于600 ml無菌生理鹽水，灌注溫度45℃，灌注時(shí)間45 min，灌注速度150 ml/min。
　　2.①灌注期間觀察患者的生命特征變化；②灌注后密切復(fù)查患者血常規(guī)、電解質(zhì)及肝腎功能變化選擇；③WHO制定的抗癌藥急性和亞急性毒副反應(yīng)的表現(xiàn)和分級標(biāo)準(zhǔn)評價(jià)化療消化道毒副作用，填寫化療觀察表；④隨訪6~24個(gè)月，定期膀胱鏡復(fù)查患者腫瘤變化狀況，觀察療效。
　　結(jié)果：
　　1.①患者膀胱腔內(nèi)熱灌注化療期間

11、患者生命體征無明顯異常，體表溫度無明顯異常，未發(fā)現(xiàn)有與治療相關(guān)的嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生。②4例患者治療后尿頻、尿急、尿痛、排尿不適的癥狀在治療后3天~2周內(nèi)逐漸消失。③消化道毒副作用均為0~Ⅰ級反應(yīng)，無一例出現(xiàn)惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)。④所有患者在灌注后第二天復(fù)查血常規(guī)、電解質(zhì)及肝腎功能，抽血結(jié)果無明顯異常，無一例出現(xiàn)骨髓抑制、肝腎功能損害。
　　2.治療后3個(gè)月復(fù)查膀胱鏡，均顯示膀胱粘膜正常，未見明顯充血、水腫、瘢痕形成，雙側(cè)輸尿管開口

12、好，噴尿正常，取正常膀胱粘膜后出鏡，見尿道無異常，尿道未見明顯充血、水腫，無尿道狹窄。病理結(jié)果顯示：膀胱粘膜結(jié)構(gòu)清晰，腺體排列整齊，未見明顯異常。復(fù)查B超亦未見腎、輸尿管積水的發(fā)生。
　　3.所有14例患者均獲得隨訪，隨訪時(shí)間為12~24月，平均為20月?；颊呔≡?，無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。膀胱局部復(fù)發(fā)3例，復(fù)發(fā)時(shí)間為6~12月，平均10月，中位時(shí)間18月，復(fù)發(fā)個(gè)數(shù)1~2個(gè)，平均1.7個(gè)，復(fù)發(fā)后患者均行經(jīng)尿道膀胱腫瘤電切。1例

13、患者在HIVEC治療12月后復(fù)發(fā)，經(jīng)TURBT術(shù)后再行HIVEC治療1療程，隨訪12月未見到復(fù)發(fā)；另2例復(fù)發(fā)患者TURBT術(shù)后未行HIVEC治療，6月后均再次局部腫瘤復(fù)發(fā)；余患者均未見腫瘤復(fù)發(fā)。
　　結(jié)論：
　　1.膀胱熱灌注化療應(yīng)用于臨床安全、可靠。
　　2.在本治療方案下，HIVEC治療對人體生命體征無明顯不良影響，未有嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生。
　　3.對于淺表性TCC經(jīng)尿道切除術(shù)患者，行MMC膀胱HIVEC治療可