重要病毒蛋白對(duì)雙鏈RNA依賴性激酶PKR抑制作用的體外分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、雙鏈RNA依賴的蛋白激酶PKR屬于絲/蘇蛋白激酶亞家族成員，它被激活后會(huì)形成同源二聚體，發(fā)生自身磷酸化，隨后將其底物磷酸化，在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞生長、分化、凋亡過程中發(fā)揮重要作用。其中PKR最突出的作用是在天然免疫方面，例如病毒感染宿主細(xì)胞后，通過磷酸化eIF2α來抑制mRNA的翻譯，引起蛋白合成終止。為了抵御宿主這種免疫調(diào)控，病毒進(jìn)化出相應(yīng)策略來抑制該過程：其中流感病毒NS1蛋白可以抑制PKR的激活，Ⅰ型單純皰疹病毒(HSV-1)的I

2、CP34.5則能夠介導(dǎo)eIF2α脫磷酸化。為了探明這種機(jī)制，我們對(duì)這些病毒蛋白與PKR、eIF2α的相關(guān)作用進(jìn)行了初步研究。
　　 本論文研究中利用原核細(xì)胞大腸桿菌表達(dá)重組蛋白、并通過親和層析和離子交換層析等技術(shù)手段純化了PKR、eIF2α和禽流感NS1蛋白，建立了體外檢測(cè)PKR活性和eIF2α脫磷酸化作用的實(shí)驗(yàn)體系，并檢測(cè)了高致病性禽流感病毒的NS1蛋白和HSV-1的ICP34.5對(duì)其相關(guān)影響。實(shí)驗(yàn)表明：在體外，NS1蛋白能夠

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